Question

4．2008年诺贝尔化学奖授予了3位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外线的激发下发出荧光，借助GFP发出的荧光可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋自质的功能．2006年12月26月，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农大降生，具体培育过程如图所示，请据图回答下列问题：

（1）上述过程涉及到的现代生物技术，属于分子水平的是基因工程；
（2）绿色荧光蛋白基因我们称之为目的基因，在将其导人受体细胞前需将其与载体结合以构建基因表达载体，其中的启动子是RNA聚合酶的识别和结合位点，能驱动转录．在其过程中需要用到的工具酶有限制性内切酶、DNA连接酶．B过程最有效地方法是显微注射法；
（3）若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理猪胚胎的部分组织；
（4）E过程中若要获得大量的卵母细胞需用注射促性腺激素方法处理成年母猪；
（5）经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多的转基因克隆猪，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行同期发情处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境．

Answer 1

分析 分析图解，可以看出绿色荧光蛋白转基因克隆猪多项生物工程技术．
图中A表示目的基因的获取；C供核细胞的获取，B将目的基因导入猪胎儿的成纤维细胞，E是卵母细胞的获取，D和F为核移植，G为早期胚胎培养，H为胚胎移植，I是代孕个体产下出绿色荧光蛋白转基因克隆猪．由此可见，该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术．

解答 解：（1）根据试题分析，图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪多项生物工程技术．属于分子水平的是基因工程．
（2）在将目的基因导人受体细胞前需将其与载体结合以构建因表达载体，启动子是基因表达载体的必须组成，是RNA聚合酶的识别位点，能驱动转录．在该过程中需要用到的工具酶有限制性内切酶、DNA连接酶，B过程是将目的基因导入受体细胞，最有效地方法是显微注射法．
（3）若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理猪胚胎的部分组织．
（4）若要获得大量的卵母细胞需用促性腺激素处理成年母猪，使其多排卵．
（5）经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多的转基因克隆猪，且在进行胚胎移植之前，需要对代孕母猪进行同期发情处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境．
故答案为：
（1）基因工程
 （2）基因表达载体  限制性核酸内切酶   DNA连接酶  显微注射技术   
（3）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）
（4）注射促性腺激素   
（5）胚胎分割  同期发情

点评 本题结合我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆鼠的培育过程示意图，考查基因工程的原理及技术、及胚胎工程技术，重点考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作过程，能准确判断图中各步骤的名称及采用的生物技术．