Question

12．关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，错误的是（　　）

• A． 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
• B． 取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上
• C． 熔化称好的牛肉膏时，应先用玻棒将称量纸小心取出
• D． 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时

Answer 1

分析 1、统计菌落数目的方法：
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
2、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
（1）计算：依据是培养基配方的比例．
（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖．
（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL．
（4）调pH；
（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌．
（6）倒平板．

解答 解：A、用蒸馏水配制牛肉育蛋白陈培养基，先经高温、高压灭菌，后倒平板，A正确；
B、测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法，即取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，B正确；
C、将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，并加热，C错误；
D、平板倒置后，将将实验组和对照组在37℃恒温培养24-48小时，D正确．
故选：C．

点评 本题考查了检测土壤中细菌总数实验的有关知识，要求考生能够掌握统计菌落数目的方法，识记牛肉膏蛋白胨培养基配置的方法步骤．