Question

20．毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．请回答相关问题：

（1）过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和B．（A．DNA聚合酶   B．DNA连接酶   C．逆转录酶 D．解旋酶）
（2）在过程②中，用胰蛋白酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞，置于CO₂恒温培养箱中培养．
（3）在过程③中，一般用促性腺激素处理供体母牛，使其超数排卵；对供体母牛和代孕母牛进行同期发情处理．
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是早期胚胎体外培养．在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶、DNA连接酶和运载体；②表示动物细胞培养过程，该过程需要采用胰蛋白酶处理组织块以获得单个细胞；③表示卵母细胞的采集和培养过程．

解答 解：（1）①表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次用DNA连接酶将目的基因与运载体连接起来．
（2）过程②表示动物细胞培养，从羊的胚胎中取胎儿成纤维细胞，用胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理形成单个细胞．培养时，将培养瓶置于含95%的空气（维持细胞代谢）和5%CO₂（维持培养基（液）的pH）的混合气体培养箱中进行培养．
（3）过程③表示卵母细胞的采集和培养，要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理；胚胎移植时，需要对供受体进行同期发情处理．
（4）从重组细胞到早期胚胎需要采用早期胚胎培养技术；在胚胎移植时，可通过胚胎分割技术获得更多的胚胎．
故答案为：
（1）B    
（2）胰蛋白酶   CO₂恒温培养箱   
（3）促性腺激素    同期发情
（4）早期胚胎体外培养      胚胎分割

点评 本题结合转基因山羊培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记所列知识要点，能准确判断图中各过程的名称，并能在较简单的情境中使用，属于考纲识记层次的考查．