将某细菌的基因A导入大肠杆菌内.制备“工程菌的示意图．请据图回答:(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板.在酶的催化下.合成互补的单链DNA.然后在作用下合成双链DNA.从而获得所需基因,二是根据目标蛋白质的序列.推测出响应的mRNA序列.然后按照碱基互补配对原则.推测其DNA的序列.再通过化学方法合成所需基因．(2)� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．

请据图回答：
（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在

酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在

作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的

序列，推测出响应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的

序列，再通过化学方法合成所需基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有

、

、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为

．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是

．

考点：真题集萃,基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、目的基因：主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子．获得目的基因的方法：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）．
2、PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）．PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制，需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），以指数的方式扩增，即约2ⁿ．
3、基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
4、将目的基因导入受体细胞，如受体细胞是植物细胞，常用农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的），具体过程：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．另外，还可用基因枪法和花粉管通道法；如果受体细胞是动物细胞，常用显微注射技术；如果受体细胞是微生物细胞，用Ca²⁺处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合（在缓冲液中）→一定温度下，感受态细胞吸收DNA分子，完成转化．

解答： 解：（1）利用逆转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子；根据蛋白质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成．
（2）PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件．
（3）目的基因和运载体结合，形成基因表达载体．
（4）在利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca²⁺处理，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子．
故答案为：
（1）逆转录； DNA聚合酶；氨基酸；脱氧核苷酸；
（2）引物；模板（A基因）；
（3）基因表达载体；
（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子；

点评：本题考查了基因工程过程和应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．