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15.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白.图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图;图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程,据图回答下列问题:
(1)将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有4种DNA片段.过程②需要用到DNA连接酶酶.
(2)假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱 基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列,现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割,并能获得所需重组质粒吗?并请说明理由能,切割后露出的黏性末端相同.
(3)若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒D
A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开         B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开  D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
(4)图2中α链是mRNA.不同细胞的同一DNA进行过程③时启用的起始点不完全相同(在“都相同”“都不同”“不完全相同”中选择),其原因是不同组织细胞中基因会进行选择性表达
(5)要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达,在分子水平上可用抗原-抗体杂交法进行检测,如果出现杂交带,说明目的基因已经表达蛋白质产品.
(6)质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因细胞筛选出来.

分析 1、由于HindⅢ与BamHⅠ两种限制酶酶切形成的黏性末端不一样,图中①中的DNA同时被这两种限制酶切割后产生四种基因片段,即_B、HB、BH、B_ (H表示HindⅢ,B表示BamHⅠ).
2、图2表示基因的表达,DNA转录形成信使RNA(α链),翻译形成多肽链.

解答 解:(1)图中①的DNA含有两个BamHⅠ酶的切割位点,含有一个HindⅢ酶的切割位点,所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后,反应管中有4种DNA片段.过程②中将目的基因与运载体连接起来需要用到DNA连接酶.
(2)由图可知,BamHⅠ和BclⅠ切割DNA后露出的黏性末端相同.因此,质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为限制酶BclⅠ的碱基序列后,用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,用BamHⅠ和HindⅢ切割目的基因,仍能获得重组质粒.
(3)质粒和目的基因都被HindⅢ切割,形成相同的黏性末端,则形成的重组质粒还能被HindⅢ切割;质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列,则形成的黏性末端是,而目的基因被BamHⅠ切割,则形成的黏性末端,则形成的重组DNA片段是,不能被BamHⅠ识别和切割.根据酶切位点和识别的碱基序列可知,重组质粒只能被能被HindⅢ切开但不能被BamHⅠ切开.
(4)从图2可知,a链形成是以DNA一条链作为模板进行转录形成的信使RNA分子;不同组织细胞的相同DNA在转录时,如果是相同基因一般转录起点相同,不同的基因转录起点不同,原因是基因的选择性表达.
(5)在分子水平上检测目的基因是否表达可用抗原-抗体杂交法,如果出现杂交带,说明目的基因已经表达蛋白质产品.
(6)质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因细胞筛选出来.
故答案为:
(1)4   DNA连接酶
(2)能,切割后露出的黏性末端相同
(3)D
(4)mRNA     不完全相同     不同组织细胞中基因会进行选择性表达
(5)抗原-抗体杂交
(6)鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因细胞筛选出来

点评 本题以转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图为载体,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节,能结合图中信息准确答题,属于中等难度题.

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