Question

2012年诺贝尔医学和生理学奖授予英国科学家约翰?戈登和日本科学家山中伸弥．约翰?戈登在20世纪60年代做过一个划时代的实验：把美洲爪蟾的小肠上皮细胞核注入去核的卵细胞，结果发现一部分卵依然可以发育成蝌蚪，其中的一部分蝌蚪可以继续发育成为成熟的爪蟾．山中伸弥等科学家将四个关键基因转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞（iPS），这些干细胞可再转化成老鼠体内任何种类的细胞．回答下列问题
（1）动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是

 

．
（2）从卵巢中吸取的卵母细胞，一般要培养到

 

阶段才能用于实验，实验中要用微型吸管吸出

 

与卵母细胞的

 

；从供体动物取出体细胞后，通过

 

技术将供体细胞注入去核卵母细胞，通过病毒介导或者

 

（物理）等方式使两个细胞融合，供体细胞进入受体卵母细胞内构建重组胚胎．当胚胎发育到

 

阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内．
（3）在山中伸弥的实验中，利用了逆转录病毒，该病毒的作用是

 

．
（4）一般情况下，体外扩增目的基因常用的方法是

 

．在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增值，这种现象称为细胞的

 

．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用

 

处理．

Answer 1

考点：动物细胞核移植技术,基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：基因工程中载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎．在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育．

解答： 解：（1）胚胎细胞核移植容易成功的原因是胚胎细胞分化程度低，全能性较高．
（2）从卵巢中吸取的卵母细胞，一般要培养到 MⅡ时期才能用于实验，用微型吸管吸出 第一极体与卵母细胞的 细胞核；通过显微注射技术将供体细胞注入去核卵母细胞，通过病毒介导或者 电脉冲（或电刺激）等方式使两个细胞融合．胚胎发育到 桑椹胚或囊胚阶段时可进行胚胎移植．
（3）基因工程中，病毒可用作目的基因的载体．
（4）体外扩增基因的方法是PCR技术，在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增值，这种现象称为细胞的 接触抑制．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用 胰蛋白酶处理．
故答案为：
（1）胚胎细胞分化程度低，全能性较高
（2）MⅡ中期（减数分裂第二次分裂中期）   第一极体   细胞核   显微注射     电脉冲（或电刺激）   桑椹胚或囊胚
（3）目的基因的载体
（4）PCR技术（多聚酶链式反应）  接触抑制    胰蛋白酶

点评：本题考查动物细胞工程，要求学生识记动物细胞培养的具体过程，理解核移植操作过程，能把握知识间的联系形成知识网络．