题目内容

11.多环芳烃是具有致癌、致畸、致突变作用的全球性污染物,是煤、石油、有机高分子化合物等有机物不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物,包括萘、蒽、菲、芘等150余种化合物.某研究小组从一污水处理厂的污泥中筛选到一株可降解萘、蒽的细菌,命名为BDP01.
(1)该研究小组所用的培养基应以萘或蒽作为唯一碳源,其目的是筛选出BDP01菌株,从功能看该培养基类型属于选择培养基.
(2)接种时所用的接种环通过灼烧灭菌,在第二次及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,该分离纯化方法称平板划线法.
(3)下面的图1和图2为该研究小组进行的其中两个实验的实验结果图,菌株的生长量以分光光度计于600nm处测定的光吸收值(OD600)表示.

①测定菌株生长量时用液体培养基,并需振荡培养.振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快.分析其原因是:振荡培养能提高培养液中溶氧量的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率.
②由图1可见,菌株生长量较高的温度范围是30~35℃.图2结果表明,BDP01对pH的适应范围较小,在酸性条件下的生长量要小于碱性条件下的.
③结合图2推测,进行图1相关实验时培养基的pH最可能为7.0(用图2中相关数值表示).
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定(或分类).

分析 解答本题需掌握:微生物实验室培养的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌及高压蒸汽灭菌;
接种方法:平板划线法和稀释涂布平板法;
培养基配置的成分:碳源、氮源、水、无机盐及特殊生长因子,此外培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的需求;
分析图形:温度和pH通过影响酶的活性影响细胞代谢,可以看出在一定范围内,不同培养温度、pH对BDP01在萘、蒽培养基中生长量不同.超过最适温度或pH,BDP01在萘、蒽培养基中生长量都下降.

解答 解:(1)筛选微生物用选择培养基,以萘或蒽作为唯一碳源的培养基筛选出的是能降解萘或蒽的微生物.
(2)接种环通过灼烧灭菌,使用接种环操作的分离方法是平板划线法,从第二次开始每次都是从上一次划线的末端开始划线,因为线条末端细菌的数目比线条起始处要少.
(3)①测定菌株的生长量涉及微生物在特定条件下的繁殖,需用液体培养基.振荡培养一方面可使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能增加溶液中的溶氧量.
②温度为自变量,菌株生长量较高的温度范围是30~35℃;BDP01对pH的适应范围较小,在酸性条件下的生长量要小于碱性条件下的生长量.
③图1中温度为自变量,pH为无关变量,要选择适宜的pH条件,即图2中的PH=7.0.
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定(或分类).
故答案为:
(1)筛选出BDP01菌株 选择
(2)灼烧 上一次划线的末端 平板划线
(3)①溶氧量   营养物质  ②30~35℃小 ③7.0
(4)鉴定(或分类)

点评 本题主要考查微生物的筛选与培养,意在提高学生微生物分离过程的识记与理解,提高实验操作能力.

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