Question

请回答下列有关问题：
（1）基因工程是一种__________操作技术，需要借助限制酶、连接酶和载体才能进行。
（2）培育转基因生物的操作是：先通过各种方法获得目的基因，然后将目的基因与__________所需要的多种原件组装起来构成一个__________，再将其导入受体细胞，并使__________。
（3）为获得纯度相对较高的DNA，某同学以鸡血为材料展开了实验探究，实验步骤如下：
A.取鸡血细胞悬液10mL，加蒸馏水20mL，同时用玻棒快速搅拌，过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中。
B.沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻棒沿一个方向轻轻搅拌，同时不断收集析出的物质。
C.根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线（如图）：

①如果只要收集纤维蛋白，可采取的措施是____________________。
②当硫酸铵溶液的饱和度最低约为__________时，DNA的溶解度最小，与此同时析出的物质还有__________。
③如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的办法是______________________________。（答出一点即可）

Answer 1

（1）DNA（1分）
（2）基因   表达 表达载体 目的基因整合到受体细胞的DNA上
（3）①在硫酸铵浓度达到30％之前收集析出物
②65％ 球蛋白、纤维蛋白（tRNA）
③将DNA与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中，收集再次析出物；用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）处理溶有DNA与蛋白质的溶液；将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60~75℃的恒温水浴箱中保温一段时间（答出一点即可）

解析试题分析：
（1）基因工程的操作对象是基因或DNA分子。
（2）基因工程的一般步骤是：获取目的基因、构建基因表达载体、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，因此可以填上相应内容。
（3）①从实验结果可以看出，当硫酸铵浓度为30%时，开始析出球蛋白，因此需要控制硫酸铵浓度为30%之前收集纤维蛋白。
②从实验结果中可以看出，当硫酸铵浓度约为65%时，DNA全部析出，因此大约为65%时，DNA的溶解度最小，同时析出的物质还有纤维蛋白、球蛋白和少量的tRNA。
③提纯DNA，实际上就是把DNA与蛋白质分开，可以采用如下方法：DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的DNA；也可以用蛋白酶处理，使蛋白质水解；将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60~75℃的恒温水浴箱中保温一段时间，蛋白质变性析出，DNA不变性。
考点：本题考查基因工程、DNA的粗提取和鉴定实验的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。