题目内容
下图表示应用现代生物技术制备甲型H1N5病毒抗体的设想，请回答下列问题：
（1）在培育甲型H1N5病毒抗体转基因奶牛的过程中，①过程属于基因工程中_________的构建，这要求甲型H1N5病毒抗体基因的首端必须含有_______的启动子。
（2）③过程需将受精卵培养到___________时期再植入母体。暂不移入的胚胎可使用__________方法保存，牛胚胎干细胞（ES）可由这些早期胚胎中分离培养获得，在滋养层细胞上培养能维持_________的状态，对ES细胞进行定向________后可用于器官移植。
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，1最可能是_________细胞，筛选出的Ⅱ细胞才既能_________________又能产生特定抗体。
（4）制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术．与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用___________________对细胞进行处理，以除去细胞壁：常用的促融剂是______________________。
（1）基因表达载体（2分） 牛乳腺蛋白基因（2分）
（2）桑椹胚或囊胚（2分） 冷冻（或低温）（2分） 不分化（2分） 诱导分化（1分）
（3）浆细胞（效应B细胞或已免疫的B細胞）（1分） 无限增殖（1分）
（4）纤维素酶和果胶酶（1分） PEG（聚乙二醇）（1分）
解析试题分析：（1）在培育甲型H1N5病毒抗体转基因奶牛的过程中，①过程属于基因工程中基因表达载体的构建，这要求甲型H1N5病毒抗体基因的首端必须含有牛乳腺蛋白基因的启动子。
（2）③过程需将受精卵培养到桑椹胚或囊胚时期再植入母体。暂不移入的胚胎可使用冷冻（或低温）方法保存，牛胚胎干细胞（ES）可由这些早期胚胎中分离培养获得，在滋养层细胞上培养能维持不分化的状态，对ES细胞进行定向诱导分化后可用于器官移植。
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，1最可能是浆细胞（效应B细胞或已免疫的B細胞）细胞，筛选出的Ⅱ细胞才既能无限增殖又能产生特定抗体。
（4）制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术．与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用纤维素酶和果胶酶对细胞进行处理，以除去细胞壁：常用的促融剂是PEG（聚乙二醇）。
考点：本题考查基因工程、胚胎工程和细胞工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。
名校课堂系列答案
Ⅰ.白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内的养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。
请根据上述材料回答下面的问题。
(1)从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→______→性能测定。白僵菌的菌样应从______中采集。
(2)分离白僵菌菌种的培养基属于______培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于______(营养物质)。
Ⅱ.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：
(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
(2)用“稀释涂布平板法”接种样品。
(3)适宜温度下培养。
①为测定大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是（ ）
| A．一个平板，统计的菌落数是23 |
| B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24 |
| C．三个平板，统计的菌落数分别为21、5和52，取平均值26 |
| D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25 |
③用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量______。
④某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？______。
Ⅰ某兴趣小组成员为了探究酵母菌在呼吸作用过程中气体体积的变化（已知相同条件下，分子数相同的任何气体，体积相同），进行了实验．在装有酵母菌和足量葡萄糖溶液的气球中通入O2和CO2直到饱和，再注入一定量的氧气，扎紧后放入装有温水的量筒中（如图所示），记下液面的读数，以后每隔一段时间进行观察并记录量筒中液面的读数．请回答下列问题：
（1）从呼吸方式上，酵母菌是 型；其细胞结构与下列哪种生物有明显的区别？
| A．水稻 | B．蘑菇 | C．西瓜 | D．大肠杆菌 |
（3）若将装置中的温水换成冷水，重复以上实验，则量筒内液面变化的速率将 （选填“加快”、“不变”或“减慢”）。
Ⅱ在探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验中，需利用显微计数板对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由25×16=400个小格组成，容纳液体总体积为0.1 mm3。某同学操作时将l mL酵母菌样品加99 mL无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液，进行观察计数。
(1)在实验中，某同学的部分实验操作过程是这样的：①从静置试管中吸取酵母菌培养液加入计数板进行计数，记录数据；②把酵母菌培养液放置在冰箱中；③第七天再取样计数，记录数据，统计分析绘成曲线。请纠正该同学实验操作中的3处错误：
① ；
② ；
③ 。
(2)在实验前应该对计数板、吸管等器具进行 处理。
(3)如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应采取的措施是 。
(4)如果观察到上图所示a、b、c、d、e 5个中格共80个小格内共有酵母菌48个，则上述1 mL酵母菌样品加99 mL无菌水稀释后有酵母菌 个；要获得较为准确的数值，减少误差，你认为该怎么做?
