Question

19．请回答下列有关微生物培养和分离的问题．
（1）筛选石油分解菌一般要经过如下的步骤：海水取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到培养基上→挑选菌落，其中第二步的目的是增加石油分解菌的浓度．
（2）培养微生物时，获得纯洁培养物的关键是防止外来杂菌入侵（无菌操作）．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行．采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养．
（3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采用临时保藏的方法，但这种方法有两个缺点：保存的时间不长；菌种易被污染或产生变异．
（4）做完实验将培养基倒掉之前，一定要进行灭菌处理，以免污染环境．

Answer 1

分析 1．无菌技术的主要内容
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
2、菌种保藏是一切微生物工作的基础，其目的：是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染，并保持其优良性状，以利于生产和科研应用．
菌种保藏的原理：是为了达到长期保持菌种的优良特性，核心问题是必须降低菌种变异率，而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长、繁殖过程，因此必须创造一种环境，使微生物处于新陈代谢最低水平，生长繁殖不活跃状态．

解答 解：（1）在实验室筛选所要的特定菌种一般步骤为：海水取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到培养基上→挑选菌落，其中选择培养就是利用制成的富含石油选择培养基来培养细菌，以增加石油分解菌浓度．
（2）培养微生物时，获得纯洁培养物的关键是防止外来杂菌入侵（无菌操作）．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行．采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养．
（3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采用临时保藏的方法，但这种方法有两个缺点：保存的时间不长；菌种易被污染或产生变异．
（4）做完实验将培养基倒掉之前，一定要进行灭菌处理，防止环境污染．
故答案为：
（1）选择培养    增加石油分解菌的浓度
（2）防止外来杂菌入侵（无菌操作）    酒精灯火焰    倒置
（3）保存的时间不长     菌种易被污染或产生变异
（4）灭菌     污染环境

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够微生物培养过程中无菌技术的主要内容，掌握菌种保存的方法和优缺点．