Question

16．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G^↓GATCC-；限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-^↓GATC-．据图判断下列操作正确的是（　　）

• A． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
• B． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
• C． 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
• D． 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列．要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口．

解答 解：限制酶I的识别序列和切点是-G^↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-^↓GATC-，可知限制酶II能够识别和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端．
根据题意和图示分析可知：目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是-G^↓GATCC-和限制酶II的识别序列和切点是-^↓GATC-，只有用限制酶Ⅱ才能将目的基因切割下来．
质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶Ⅱ的识别序列和限制酶Ⅰ的识别序列；如果用限制酶Ⅱ切割，则GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶Ⅰ切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA．
故选：D．

点评 本题考查基因工程限制酶相关知识，意在考查考生的识图和理解能力，解题的关键是理解基因表达载体构建的过程．