Question

8．回答有关微生物培养和筛选的问题
空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降．某研究小组欲用平板（培养基）收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况．实验步骤如下：
①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）；
②制作无菌平板（培养基）；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数．
请回答下列问题：
（1）该培养基中微生物所需的氮源是牛肉膏和蛋白胨，成分X通常是琼脂．
（2）步骤③中，实验组的操作是将不同平板分别置于教室中的将各实验组平板放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间，敞口静置一段时间．
（3）若在某次调查中，某一高度实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中培养基出现了（微生物）污染现象．若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确（填“正确”或“不正确”）．
（4）若想确定平板上的菌落是否有大肠杆菌，应在培养基中加入伊红--美蓝；若要筛选出空气中的真菌，应加入抗生素．
枯草芽孢杆菌广泛分布在含淀粉丰富的土壤中．若要从土壤中分离筛选出能高效降解淀粉的枯草芽孢杆菌，另一研究小组做了如下实验：
①制备土壤稀释液：取土样与水充分混合，放入锥形瓶中，常压80℃的水浴处理样品1小时后，取出冷却．然后制成10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5不同稀释度的土壤溶液．
②用无菌滴管吸取1ml10^-5菌液，用稀释涂布平板法法接种于以淀粉为唯一碳源的平板上．
③将平板于37°C培养箱中培养1-3d后，加入碘液，观察菌落周围白色区域，如图所示．
（5）若要大规模产业化该淀粉酶，则首选的菌株是B．

Answer 1

分析 微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．

解答 解：（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物，都可以作为氮源；平板为固体培养基，故需要加入琼脂． （2）实验探究的是教室内不同高度空气中微生物的分布，其中自变量为不同高度，故需在不同高度下放置开盖平板．同时，为了保证单一变量，需要保证开盖放置时间一致；为了保证实验可靠，需要设置多个平行实验．
（3）在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落．若出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用．
（4）鉴别大肠杆菌常用伊红和美蓝，这种培养基称为鉴别培养基．若要筛选出空气中的真菌，应加入抗生素．
根据实验步骤可知，实验将土壤溶液稀释成不同浓度，并且实验目的为从土壤中分离筛选出能高效降解淀粉的枯草芽孢杆菌，因此需要用无菌滴管吸取1ml10^-5菌液，用稀释涂布平板法法接种于以淀粉为唯一碳源的平板上．
（5）若要大规模产业化该淀粉酶，需要选取产生淀粉酶最多的菌株，而图中B的透明圈最大，因此B菌落产生的淀粉酶最多，因此首选的菌株是B．
故答案为：
（1）牛肉膏和蛋白胨  琼脂
（2）将各实验组平板放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间 
（3）（微生物）污染   不正确
（4）伊红--美蓝    抗生素    稀释涂布平板法    淀粉
（5）B

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记不同的培养基成分为微生物提供的营养元素，掌握微生物分离与纯化的方法，再结合所学知识准确答题．