Question

回答下列有关基因表达和基因工程问题．

（1）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正确的是__________（多选）

A．若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生2个平滑末端

B．若用限制酶MspⅠ酶切含目的基因的DNA片段，则获得的最长的DNA片段长度为788bp

C．若需将目的基因D导入图2中的质粒，应选择限制酶是BamHⅠ

D．为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A

（2）假设某基因的右侧序列是AAGCTTGAC∥TTCGAACTG，应选择下表中的__________酶（填数字序号）作为内切酶．

（3）请在图3方框内画出上题酶切割后产生的两个末端的碱基序列．__________

图4甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图．图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色．（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）

（4）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒？__________．

（5）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察．有人说，只有出现长度为3.0kb和3.7kb的片段，才可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位之间的碱基对忽略不计）．你如何评价之？__________．

Answer 1