Question

科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。其过程大致如下图所示：

(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核是                              
(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有                  、              等
(3)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的                                     特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为                       
(4)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是             
(5)一个基因表达载体的组成必须有                                        等
(6)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是                    。若从个体水平来做何检测？               。

Answer 1

(1)基因表达载体的构建
(2) 从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因 、通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成等（任意两个均可） 
⑶可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上      转化
(4)农杆菌转化法 (5)启动子、终止子、目的基因和标记基因
(6) DNA分子杂交技术 抗虫的接种实验

解析试题分析：⑴基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。⑵获取目的基因的方法有从基因文库中获取；化学方法人工合成等。⑶农杆菌的T—DNA具有转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上。目的基因在受体细胞中表达，称为转化。⑷将目的基因导入到植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法，本题使用的是农杆菌转化法。⑸基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等 ⑹从分子水平检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是DNA分子杂交技术；从个体水平上检测的方法是接种抗虫实验。
考点：本题主要考查基因工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。