题目内容

【题目】某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O

蛋白胨

葡萄糖

尿素

琼脂

1.4g

2.1g

0.2g

1.0g

10.0g

1.0g

15.0g

(1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____(能/不能),原因是________________。

(2)培养基用___________方法灭菌,培养皿用__________方法灭菌,待培养基冷却到___________℃左右时,在_____附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。

(3)统计土壤样品中活菌数目:将土壤样品稀释100倍,然后将0.1mL稀释液分别接种到3个平板上; 经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37.据此可得出土壤样品的活菌数为___________.对获得的目的菌种,可采用____的方法长期保存.

(4)培养分解尿素的细菌时,需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________。

(5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过___________处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

【答案】不能 培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(培养基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素) 高压蒸汽灭菌 干热灭菌 50 酒精灯火焰 3.8×107 甘油管藏 将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生 灭菌

【解析】

筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一的碳源的选择培养基.分离纤维素分解菌计数时需要用稀释涂布平板法接种。

(1)据表分析,表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物,所以不能分离尿素分解菌。

(2)微生物培养中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌,玻璃器皿可以使用干热灭菌。倒平板时需要培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰旁进行,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

(3)根据题意可知,每升样液中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×100×1000=3.8×107。对获得的目的菌种,可采用甘油管藏的方法长期保存。

(4)检测培养基是否被污染,需要将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,如果有菌落数目被污染,否则没有被污染。

(5)为防止微生物污染环境和操作者,实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌后倒掉。

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