Question

回答下列关于微生物的问题．
营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株．基本培养基中加入一些营养物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基．营养缺陷型在基础理论研究和生产应用中有广泛作用．青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株．筛选营养缺陷型菌株一般通过四个环节，即诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型．
（1）取新活化枯草芽孢杆菌制备菌悬液，再用紫外线照射处理．下列关于将诱变后存活的个体培养，淘汰野生型菌株的做法和原理，正确的是

 

（多选）
A、培养在含有青霉素的基本培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
B、培养在含有青霉素的补充培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
C、完全培养基中青霉素可以杀死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存
D、补充培养基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存
E、基本培养基中野生型可以生长繁殖，青霉素将其杀死
F、基本培养基中缺陷型不可以生长繁殖，青霉素不能将其杀死
（2）在培养皿倒上一层不含菌的基本培养基，待冷凝后加上一层含菌的基本培养基，其后再浇上一层不含菌的基本培养基．经培养后出现菌落，在皿底将菌落标记为A₁、A₂…，然后在其上再倒一薄层完全培养基，再培养，出现新的菌落，在皿底标记为B₁、B₂…，则A菌落与B菌落分别较可能是

 

、

 

（均选填野生型/突变型）．
（3）将待测菌落处理后涂布于某培养基平板上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A培养基和B培养基平板上．前后位置及号码相对应．培养后观察．如图一．为检出营养缺陷型，A、B培养基应分别为

 

培养基、

 

培养基．菌落

 

为营养缺陷型． 
（4）为鉴定上步检出的营养缺陷型是哪种营养缺陷型，将待测菌种悬液涂于图二含有基本培养基的培养皿中，培养皿背面划线标注C、D、E三区．C、D、E为三滤纸片，分别浸有氨基酸混合液、维生素混合液和碱基混合液．培养后观察．当观察到

 

现象，说明是该营养缺陷型．图二培养基也可称为

 

培养基．
（5）如检测菌为碱基类营养缺陷型，要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型，可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片，如加浸

 

的滤纸片．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养

专题：

分析：由题意知，营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株．

解答： 解：（1）营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株，A、E、F正确；
（2）培养在含有青霉素的基本培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株，基本培养基中野生型可以生长繁殖，缺陷型不能生长繁殖；
（3）A、B培养基应分别为基本培养基、完全培养基；菌落6、8为营养缺陷型；
（4）当观察到某一滤纸片周围有菌生长的现象，说明是该营养缺陷型，图二培养基也可称为补充培养基；
（5）如检测菌为碱基类营养缺陷型，要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型，可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片，如加浸腺嘌呤的滤纸片．
故答案为：（1）A  E  F
（2）野生型    缺陷型菌株
（3）基本      完全      6、8
（4）某一滤纸片周围有菌生长    补充
（5）腺嘌呤（胞嘧啶等）

点评：本题主要考查微生物的实验室培养的方法．