题目内容

13．如图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图．下列叙述正确的是（　　）
A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目
B．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置
C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接
D．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

分析 分析题图：图示为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图，先采用DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌，再采用放射自显影显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置，最后进行克隆化培养．

解答 解：A、通过菌落数只能大约推测活菌数，不能准确计算样品中含有的活菌实际数目，A错误；
B、放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置，因为菌落附着在膜上的位置是固定的，放射自显影后可以一一对应起来，B正确；
C、重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子的碱基互补配对原则，C错误；
D、外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达，而复制需要有复制原点，D错误．
故选：B．

点评 本题结合题图，考查细菌培养和基因工程的有关知识，要求考生识记基因工程的技术和原理、识记细菌培养的相关知识，能运用所学的知识对各选项作出准确的判断能力．

练习册系列答案
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（2014秋•静宁县期末）下列说法中，不正确的是（ ）

A．洋葱根尖有丝分裂装片制作步骤是：解离→漂洗→染色→制片

B．在紫色洋葱表皮细胞发生质壁分离的过程中，液泡由大到小，紫色变深

C．利用无水乙醇可以提取叶绿体色素

D．在叶绿体色素分离的实验中，扩散得最慢的是叶绿素a
4．如图1表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构，图示部分基因及部分限制性内切酶作用位点．

（1）人工合成杀虫基因的过程中，原料是四种游离的脱氧核苷酸，并需要加入逆转录酶酶催化．
（2）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的末端为，则该酶识别的核苷酸序列是-GACGTC-．
（3）为了保证改造后的质粒进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长，必须去除质粒上tms和tmr（基因），可使用的限制酶是限制酶Ⅰ（或限制酶Ⅱ）．
（4）经限制酶Ⅱ改造过的质粒和带有抗虫基因的DNA分子构成重组Ti质粒，导入土壤农杆菌，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养，观察到的农杆菌生长的现象是在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长．
（5）④过程应用的生物技术主要是植物组织培养；从个体水平检测“华恢l号”具有抗虫性状的方法是害虫抗性接种实验法．
1．慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1为来源的一种病毒载体．慢病毒载体系统主要由包装载体和转移载体组成，包装载体携带的基因能够控制合成病毒颗粒蛋白；转移载体上除有基因载体必须的元件外，还有目的基因、病毒包装、逆转录和整合所需基因．当转移载体和包装载体同时转染包装细胞后，进行病毒成分的合成和包装，最终收获到携带目的基因的“假病毒颗粒”．如图是科研人员利用慢病毒载体系统培育转基因荧光鼠的主要过程．请分析回答：

（1）基因工程中运用的基因载体必须的元件有启动子、终止子、复制原点、标记基因等．
（2）过程②利用了“假病毒颗粒”具有侵染性和能将DNA整合到受体细胞染色体DNA上特点．与正常病毒相比较，这种“假病毒颗粒”的主要特点是在宿主细胞中不能增殖（不具致病性）．
（3）科学家利用ES细胞培育出转基因动物依据的主要原理是ES细胞具有发育的全能性，在利用合成培养基培养ES细胞时，还要加入血浆、血清等天然成分．
（4）经鉴定，某嵌合小鼠产生的配子中有$\frac{1}{2}$带有外源基因，请写出利用该嵌合小鼠培育纯合转基因小鼠的思路：让这只嵌合小鼠与普通小鼠杂交获得F1，再让F1中的转基因小鼠相互交配、鉴定、筛选嵌合转基因小鼠．
8．某科研小组利用转基因技术，将豌豆的A（抗虫基因）导入玉米体细胞．以获得具有抗虫性状的新品种．请回答下列问题．
（1）若要从豌豆中获得抗虫基因，可首先建立豌豆的基因组文库，再从中筛选出所需的抗虫基因．理论上，基因组文库含有生物的全部基因，cDNA文库中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技术扩增抗虫基因时，需要在反应体系中添加的有机物有DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸和耐热的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
（3）导入抗虫基因的玉米细胞通过植物组织培养技术培养成完整植株，该技术包括脱分化和再分化两个阶段．
（4）若要检查杂交细胞中是否具有A基因，在分子水平上，常采用DNA分子杂交技术，该技术用到DNA分子探针，常用同位素（同位素标记）或荧光标记．
18．某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图1所示，请回答下列问题．

（1）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状（变异性状）的来源属于基因重组．
（2）在构建重组质粒时，应选用SalI和HindIII两种酶对质粒和抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性．
（3）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤．为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌．
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素（氨苄青霉素和四环素）．从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是4和6菌落中的细菌．为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的抗盐基因作探针进行分子水平检测，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株（将烟草植株移栽到盐碱地中）的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性．
5．20世纪90年代开始兴起的DNA疫苗被称为第三次疫苗革命，医学专家将含病毒抗原基因的重组质粒注入人体表达后使人获得免疫能力．下列叙述不正确的是（　　）
A．重组质粒在内环境中表达后引起机体免疫反应
B．病毒抗原基因在体内表达时需要RNA聚合酶
C．病毒抗原基因与质粒重组时需要DNA连接酶
D．注射DNA疫苗后机体会产生相应的记忆细胞
2．为研究不同浓度的生长素类似物2，4-D对猪笼草插条的影响，研究人员做了如下实验：取生长状态相似的三年生植株，剪取长度相同的插条120段，每段保留1片嫩叶．将插条随机均分成四组，采用浸泡法处理24h后扦插．在适宜条件下培养一段时间，实验结果如下．请回答有关问题．

（1）保留嫩叶的插条比较容易成活，是因为嫩叶能产生生长素促进插条生根．处理插条时除了使用浸泡法外，还可使用沾蘸法法．后者的2，4-D溶液的浓度应比浸泡法的高．
（2）表中数据能否说明2，4-D对插条生根具有两重性？否．理由是与对照组相比，实验组对插条生根均表现为促进作用，因此不能说具有两重性．
（3）本实验的结论是在一定范围内，2，4-D既能促进插条生根也能促进插条生长；2，4-D促进插条生根的最适浓度为50mg/L．
（4）在进一步探究2，4-D促进插条伸长的最适浓度时，可根据株高数据判断所配制的2，4-D溶液的起始浓度应为50mg/L．
3．下列有关实验条件的叙述，说法正确的是（　　）
A．观察细胞的质壁分离现象可用50%的蔗糖溶液
B．鉴定蛋白质和还原性糖的实验都需要加热
C．调查红绿色盲的发病率须在患者家系中随机抽取样本
D．用于探索生长素类似物促进生根最适浓度的枝条，须插入土壤中观察培养

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