Question

8．某科研小组利用转基因技术，将豌豆的A（抗虫基因）导入玉米体细胞．以获得具有抗虫性状的新品种．请回答下列问题．
（1）若要从豌豆中获得抗虫基因，可首先建立豌豆的基因组文库，再从中筛选出所需的抗虫基因．理论上，基因组文库含有生物的全部基因，cDNA文库中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技术扩增抗虫基因时，需要在反应体系中添加的有机物有DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸和耐热的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
（3）导入抗虫基因的玉米细胞通过植物组织培养技术培养成完整植株，该技术包括脱分化和再分化两个阶段．
（4）若要检查杂交细胞中是否具有A基因，在分子水平上，常采用DNA分子杂交技术，该技术用到DNA分子探针，常用同位素（同位素标记）或荧光标记．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、植物组织培养的过程：外植体$\stackrel{脱分化}{→}$愈伤组织$\stackrel{再分化}{→}$胚状体→新植体．

解答 解：（1）若要从豌豆中获得抗虫基因，可首先建立豌豆的基因组文库，再从中筛选出所需的抗虫基因．基因文库包括基因组文库和部分基因文库，其中基因组文库含有生物的全部基因，而部分基因文库（如cDNA文库）中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技术扩增目的基因的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、2种引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）将转基因植物细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术，该技术包括脱分化和再分化两个阶段．
（4）要检查杂交细胞中是否具有A基因，可采用DNA分子杂交技术，该技术用到DNA分子探针，常用同位素或荧光标记．
故答案为：
（1）筛选  部分
（2）DNA模板    2种引物
（3）植物组织培养   脱分化    再分化
（4）DNA分子杂交    同位素（同位素标记）

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中的相关细节；识记植物组织培养的过程及相关应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．