Question

孔雀石绿（C₂₃H₂₅N₂Cl）常用作纺织业的染料，也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂．但它具有高毒性、高残留的危害，因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点．科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A．主要步骤如图1所示．

分析并回答：
（1）从①到③的培养过程中培养液应加入

 

作为唯一碳源，此过程的目的是

 

和

 

．
（2）使用

 

法可以在④上获得单个菌落．
（3）若要对获得的菌株A进行分类鉴定，可先利用

 

技术进行体外DNA扩增，此过程中采用

 

方法将DNA双链解开，而在菌株A体内，DNA复制时将双链解开则是在

 

的作用下完成的．
（4）研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响，实验结果如图2．
由上述结果可以看出，与不加金属离子的对照组相比，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有

 

作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置

 

的培养基样本作为对照．

Answer 1

考点：培养基对微生物的选择作用,微生物的分离和培养,PCR技术的基本操作和应用

专题：

分析：培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．分为液体培养基和固体培养基．接种方法：平板划线法和稀释涂布法．

解答： 解：（1）根据题意分析可知，科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A，所以从①到③的培养过程中培养液应加入孔雀石绿作为唯一碳源，此过程的目的是筛选出菌株A和增加菌株A的浓度（扩大培养）． 
（2）使用稀释涂布平板（或平板划线）法接种可以在④上获得单个菌落．
（3）若要对获得的菌株A进行分类鉴定，可先利用PCR技术进行体外DNA扩增，此过程中采用控制温度方法将DNA双链解开，即高温解链；而在菌株A体内，DNA复制时将双链解开则是在解旋酶的作用下完成的．
（4）由图分析可知，与不加金属离子的对照组相比，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置含等量的Pb²⁺但不接种菌株的培养基样本作为对照．
故答案为：
（1）孔雀石绿     筛选出菌株A     增加菌株A的浓度（扩大培养）
（2）稀释涂布平板（或平板划线）
（3）PCR    控制温度  解旋酶
（4）抑制  含等量的Pb²⁺但不接种菌株A

点评：本题主要考查微生物的利用、微生物的分离和培养的相关知识，要求考生能够识记微生物分离与纯化的方法；识记PCR技术的过程和原理，能够与体内DNA复制进行比较；能够根据题图获得有效解题信息，难度适中．