Question

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正确的是：（　　）

• A、若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏2个磷酸二酯键
• B、若图1所示DNA虚线方框内的碱基对被T-A替换，用限制酶SmaⅠ完全切割后会产生3种不同的DNA片段
• C、若切割图2中的质粒以便拼接目的基因D应选择限制酶 BamHⅠ和MboⅠ
• D、若用上述条件构建含有目的基因D的重组质粒并成功导入细菌体内，则此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：根据题意和图示分析可知：图1中：DNA片段含有2个限制酶MspⅠ切割位点，可被限制酶MspⅠ切割产生长度为534+2=536bp、796-2-2=792bp、658+2=660bp的三中DNA片段．基因D两侧序列为GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
图2中：质粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

解答： 解：A、由于限制酶MspⅠ识别的碱基序列和酶切位点为C↓CGG，在图1DNA片段中有2个，因而若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏4个磷酸二酯键，A错误；
B、若图1所示DNA虚线方框内的碱基对被T-A替换后，该段碱基序列不能被限制酶SmaⅠ识别，所以用限制酶SmaⅠ完全切割后只会产生2种不同的DNA片段，B错误；
C、限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点位于目的基因D上，若用这两种酶切割会被破坏目的基因D；运载体的两个标记基因上都有限制酶MboⅠ的切割位点，用该酶切割会破坏这两个标记基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和运载体，C错误；
D、若用上述条件构建含有目的基因D的重组质粒并成功导入细菌体内，由于破坏了抗生素A抗性基因，所以此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活，D正确．
故选：D．

点评：本题考查基因工程操作的相关知识，意在考查学生的识记能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力．