题目内容

16．根据动物细胞工程的有关知识回答下列问题
（1）进行动物细胞培养时，通常先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织分散成单个细胞；在培养过程中，应定期更换培养液，其目的是防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害．
（2）进行动物体细胞核移植时，一般都选用动物细胞培养过程中10代以内的细胞作为供体细胞，选取这类细胞的理由是10代以内的细胞一般能保持正常的（二倍体）核型，细胞内遗传物质不会发生突变．
（3）进行动物细胞融合时，诱导融合的化学试剂是聚乙二醇（PEG），该技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能．
（4）制备单克隆抗体时，需要将来自小鼠脾脏（细胞）产生的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，诱导成功后所形成杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖（无限繁殖），又能产生专一抗体．

分析 1、取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2．
3、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体．

解答 解：（1）胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织分散成单个细胞；在培养过程中，应定期更换培养液，其目的是防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害．
（2）进行动物体细胞核移植时，10代以内的细胞一般能保持正常的（二倍体）核型，细胞内遗传物质不会发生突变，因此一般都选用动物细胞培养过程中10代以内的细胞作为供体细胞．
（3）进行动物细胞融合时，诱导融合的化学试剂是聚乙二醇（PEG），该技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能．
（4）制备单克隆抗体时，需要将来自小鼠脾脏产生的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，诱导成功后所形成杂种细胞，即杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体．
故答案为：
（1）胰蛋白酶或胶原蛋白酶         防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害
（2）10代以内    10代以内的细胞一般能保持正常的（二倍体）核型，细胞内遗传物质不会发生突变
（3）聚乙二醇（PEG）    远缘杂交
（4）脾脏（细胞）     既能迅速大量繁殖（无限繁殖），又能产生专一抗体

点评 本题考查动物细胞培养和单克隆抗体的制备，要求考生识记动物细胞培养的过程，是动物细胞培养的条件，识记诱导细胞融合的手段，理解单克隆抗体制备的过程，并结合所学知识判断各小题，难度不大．

练习册系列答案
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9．回答下列与光合作用有关的实验题目：
（1）光合促进剂是一种植物生长调节剂，具有与生长素类似的作用．某科研人员利用番茄为实验材料来探究其生理作用，其实验过程如下：
实脸材料：生长状况相同且长势良好的番茄若干株、适宜浓度的光合促进剂、蒸馏水、尺、天平等．
实脸步骤
步骤一：选取生长状况相同长势良好的番茄若干株平均分为甲、乙、丙、丁四组．
步骤二：给予甲、丙两组喷洒适量且适宜浓度的光合促进剂，给予乙、丁两组喷洒等量的蒸馏水．
步骤三：将四组番茄放置于相同且适宜的条件下培养，观察四组番茄的叶片颜色，并测量计算植株的平均株高；待成熟后计算座果数量以及单果重量．
实验结果：如下表所示．植抹生长状况、产量记录表
名称平均株高（cm）座果数（个）叶片颜色平均单果重（g）
甲组220.228.2深绿172.5
乙组206.626.4绿156
丙组222.827.6深绿170
丁组218.825.8绿152.5
根据所学知识冋答下列问题：
①该实验遵循的实验原则有对照原则、单一变量原则和平行重复原则等．据表分析，推断光合促进剂增加番茄产量的原因是：能促进叶绿素的合成，提高了光能利用率，促进了植株生长，进而提高座果数和平均单果重．
②若实验过程中使用的光合促进剂浓度为a，则当光合促进剂的浓度小于a时，番茄产量不一定（填“会”、“不会”或“不一定”）降低，因为不能确定a是否为最适浓度．
（2）低温寒潮会造成农作物受灾，光合作用是受低温影响较显著的过程之一．科研人员用黄瓜研究低温弱光和低温黑暗两种预处理对叶片光合作用的影响．
①选取黄瓜叶片，沿叶脉将叶片一分为二，在相同且适宜的条件下，分别测定叶片的光合作用强度．然后进行两种预处理：一半置于低温弱光下，一半置于低温黑暗下，在培养箱内处理6小时．之后，再次置于相同且适宜的条件下，测定光合作用强度，结果如下图．该实验能得出的结论是低温弱光和低温黑暗两种预处理都降低了黄瓜叶片的光合作用强度；
低温弱光比低温黑暗的预处理对黄瓜叶片光合作用强度降低的影响更显著．
②为进一步探究上述两种预处理对光合作用强度影响的原因，用作NADP+为受体来测定NADPH生成速率的变化，结果如下：
预处理低温黑暗低温弱光
实验前试验后实验前试验后
NADPH生成速率100%85.1%100%55.8%
实验结果表明，低温弱光的预处理导致光反应减弱更显著，进一步影响暗反应中的C3还原过程，最终导致光合作用强度减弱较明显．
8．下列有关从胡萝卜中提取胡萝卜素的描述中，错误的是（　　）
A．因胡萝卜素为脂类物质，所以在从胡萝卜中提取胡萝卜素时，常用有机溶剂
B．从胡萝卜中提取胡萝卜素常用萃取法，其主要步骤为粉碎→干燥→萃取→浓缩→过滤
C．在胡萝卜颗粒加热干燥过程中，应严格将温度和时间控制在一定范围内，因为温度过高或时间过长会导致胡萝卜素分解
D．在萃取过程中，在瓶中安装冷凝回流装置是为了防止加热时有机溶剂挥发
4．一杂合子（Dd）植株自交时，含有隐性配子的花粉有50%的死亡率，则自交后代的基因型比例是（　　）
A．1：1：1B．4：1：1C．2：3：1D．1：2：1
11．某研究小组对某大豆新品种的种子萌发过程开展研究，首先将大豆种子置于适宜的环境中培养，定期检测萌发过程中种子的鲜重和气体交换速率（曲线①和②分別代表一种气体的交换速率．）如图．回答下列问题：

（1）影响种子萌发的外界因素有氧气、温度、水分（至少答出2点）．
（2）甲图中阶段Ⅱ期间，大豆种子胚细胞合成的赤霉素（或GA），解除种子休眠，促进种子萌发．阶段Ⅲ期间不可能发生的可遗传变异是基因重组．
（3）乙图a点以前，曲线①高于②的原因是种子进行了无氧呼吸，无氧呼吸不吸收氧气，但释放二氧化碳，a点以后曲线②高于①，其原因是此时种子进行呼吸作用所使用的底物可能包含一定量的脂肪（或脂肪和蛋白质）．
1．将基因型为Aa的高茎豌豆幼苗（品系甲）用秋水仙素处理后，得到四倍体植株幼苗（品系乙），将品系甲、品系乙混合种植，在自然状态下生长、得到它们的子一代．下列有关叙述正确的是（　　）
A．品系甲植株与品系乙植株杂交可得到三倍体的后代，所以它们为同一品种
B．取品系乙的花药进行离体培养再经秋水仙素处理获得的植株都为纯合子
C．将品系乙植株上所结种子单独种植，矮茎植株占$\frac{1}{36}$
D．品系甲、品系乙混合种植后，产生的子代中有二倍体、三倍体和四倍体
8．我国规定1升自来水中大肠杆菌不得超过3个．在培养基中加入伊红美蓝，可以使大肠杆菌的菌落呈深紫色，并带有金属光泽．有关部门据此对自来水中的大肠杆菌进行检测．具体步骤大致如下：
（一）用火焰灼烧自来水龙头3分钟，然后打开水龙头放水5分钟，再用无菌的三角瓶接取1000毫升水样，盖好瓶塞．
（二）将漏斗和抽滤瓶固定好，用镊子夹住滤膜边缘，将水样倒入漏斗中，边抽滤、边加水．
（三）用镊子将滤膜取出、放在无菌平板上进行培养，观察并记录实验结果．
回答下列问题：
（1）实验中所用的醋酸纤维素滤膜、漏斗、抽滤瓶、镊子等实验器材和培养基都需先用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．如需检测培养基灭菌是否彻底，常用的方法是将灭菌过的培养基在适宜的条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（2）制作本实验所用的无菌平板时，需要加入碳源和氮源、水、无机盐等大肠杆菌所必需的营养成分，以及加入琼脂，便于统计菌落外；还需要将培养基的pH调整至中性或微碱性．鉴别是否有大肠杆菌菌落，需要在培养基中加入伊红美蓝．
（3）按上述步骤制作的3个样品平板上所有的菌落数分别为49、51、47．能否据此得出每升水样中大肠杆菌数约为49的结论？不能．理由是培养基表面生长的菌落，只有部分是大肠杆菌的菌落．
5．如图是利用奶牛乳腺生物反应器制备胰岛素的流程图，请据图回答：

（1）由图可知，构建重组质粒时，为避免人胰岛素基因末端发生任意连接和运载体的自身环化应选用SmaI和PstI酶处理目的基因和运载体．要使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达，应将人胰岛素基因与奶牛乳腺蛋白基因启动子等调控元件重组在一起．
（2）①过程常用促性腺激素处理奶牛A使其排出更多的卵子，然后在恰当时期采集卵子并培养成熟；②过程采集的奶牛精子需经获能处理后，才能与成熟的卵子在专用受精溶液中完成受精．判断卵子是否受精的标志是在卵黄膜与透明带的间隙可以看到两个极体．
（3）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶牛C进行同期发情处理，使之与供体的生理状况保持相同．
（4）若要大量获得胰岛素基因，可使用PCR技术扩增目的基因，该技术需要缓冲液、四种脱氧核苷酸、目的基因、两种引物及耐高温的DNA聚合酶．
5．有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少品种对人、畜的毒性很强，人误食后如不及时医治就会危及生命，某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物．请回答下列问题：
（1）为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及水和无机盐等的选择培养基上添加适量的有机磷农药进行选择培养．
（2）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培 养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物丙（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养，理由是微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强．
（3）制备固体培养基的基本步骤是计算→称量→溶化→分装→加棉塞→包扎→高压蒸汽灭菌→倒平板．
（4）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目．

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