Question

4．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如表所示，实验步骤如图所示．请分析回答．

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000mL．
（1）按物理性质分，此培养基属于固体培养基．
（2）培养基中加入尿素的目的是，筛选目的菌这种培养基属于选择培养基．
（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖，实验需要振荡原因是为目的菌提供氧气．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，可采用平板划线法（或稀释涂布平板法）接种，获得单菌落后继续筛选．
（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是①和②，需要消毒的是③．（填序号）
①培养细菌用的培养基与培养皿
②玻棒、试管、锥形瓶和吸管
③实验操作者的双手
（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有①②③（填序号）．
①土样不同                             ②培养基污染
③操作失误                             ④没有设置对照．

Answer 1

分析 1、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
3、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）琼脂是凝固剂，因此此培养基为固体培养基．
（2）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的细菌（目的菌）．不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖，因此从功能上看，该培养基属于选择培养基．
（3）目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素，碳源来自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震荡培养，为目的菌提供氧气．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用涂布平板（划线）的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
（5）在实验中，①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌，③实验操作者的双手需要消毒．
（6）该同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染；或者是实验过程中没有进行无菌操作．
故答案为：
（1）固体培养基
（2）筛选目的菌  选择
（3）尿素  葡萄糖  为目的菌提供氧气
（4）平板划线法 （或 稀释涂布平板法）
（5）①和②③
（6）①②③

点评 本题考查了微生物培养技术的相关知识，考生要明确选择培养基的选择作用；识记培养基为微生物提供的营养成分；识记常用的接种方法和具体操作过程；特别注意灭菌和消毒的对象和区别．