Question

2．科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．

请回答以下相关问题：
（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进细胞融合可利用物理方法和化学方法，此外还可用诱导方法是灭活的病毒．细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性在于克服远缘杂交不亲和的障碍．
（2）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如下图所示．①酶A和酶B分别是限制性核酸内切酶（或限制酶）和DNA连接酶．
②应用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否成功插入II的染色体DNA上；题目中Ⅱ所指的细胞是浆细胞，Ⅲ指代的细胞具有特点是既能无限增殖又能产生特定抗体．
（3）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：
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Answer 1

分析 传统的单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．
基因工程的方法：由于效应B细胞没有细胞增殖的能力，因此选择“无限增殖调控基因（prG）”作为目的基因，“效应B细胞”作为受体细胞，以期望获得既能无限增殖、又能产生特异性抗体的效应B细胞．
细胞核移植技术生产单克隆抗体：由于某些能无限增殖的细胞的细胞质中含有无限增殖调控基因（prG），因此在细胞核移植时，选择效应B细胞的细胞核和骨髓瘤细胞的细胞质进行细胞核移植．

解答 解：（1）在制备单克隆抗体的过程中，诱导细胞融合的方法物理法、化学法或灭活的病毒．细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性在于克服远缘杂交不亲和的障碍．
（2）①在基因工程中，获取目的基因和质粒需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒．
②应用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否成功插入II的染色体DNA上；题目中Ⅱ所指的细胞是浆细胞．成功导入含有prG基因的细胞中，由于prG基因具有调控细胞无限增殖的功能，故Ⅲ中的细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中，因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中，获得重组细胞，最终获得单克隆抗体．
故答案为：
（1）灭活的病毒      克服远缘杂交不亲和的障碍
（2）限制性核酸内切酶（或限制酶）和DNA连接酶       DNA分子杂交       浆细胞       既能无限增殖又能产生特定抗体
（3）

点评 本题考查基因工程、动物细胞核移植和单克隆抗体的制备过程，比较综合．答题时要注意题干中的信息，如利用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能将浆细胞的细胞核移植到去核的含有prG基因的细胞质中，因为根据题干可知，prG基因只存在于能无限增殖细胞的细胞质中．