Question

15．运用现代生物技术改良奶牛或肉牛可提高经济产值，请回答下列问题：
（1）科学家构建含人乳铁蛋白（hLF）的基因表达载体，通过显微注射技术将其导入受体细胞而获得转基因牛；构建上述基因表达载体时用同一种限制酶切割目的基因和运载体的理由是用相同限制酶切割来源不同的DNA后，可产生相同的末端．
（2）日本科学家成功获取两头体细胞克隆的牛犊．操作者从荷兰奶牛体内分离出乳腺细胞并进行细胞培养，培养液中加入血清、血浆的作用是提供天然营养物质．而后取出乳腺细胞的细胞核并将其导入到去核的卵母细胞中以获取重组细胞．若获得的克隆牛与供体牛性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因最可能是卵母细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响．
（3）科学家在日本东京某养牛场还成功获取了由分裂的胚胎培育而成的4对试管双胞胎牛犊．获取试管牛需要进行体外受精，受精前需对精子进行获能处理，操作中可用激素对供体母牛进行超数排卵处理以增加排卵量．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）动物基因工程中，一般采用受精卵作为受体细胞，利用显微注射法将目的基因导入受体细胞；构建基因表达载体时，需要用同一种限制酶切割目的基因和运载体，从而产生相同的黏性末端，便于目的基因和运载体连接．
（2）动物细胞培养过程中，需要向培养液中加入血清、血浆，以提供天然营养物质．在细胞核移植过程中，需要取出乳腺细胞的细胞核并将其导入到去核的卵母细胞中以获取重组细胞．若获得的克隆牛与供体牛性状不完全相同，这可能是卵母细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响．
（3）获取试管牛需要进行体外受精，受精前需对精子进行获能处理，操作中可用激素对供体母牛进行超数排卵处理以增加排卵量．
故答案为：
（1）显微注射技术   用相同限制酶切割来源不同的 DNA 后，可产生相同的末端（合理即可）
（2）提供天然营养物质 去核的卵母细胞 卵母细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响
（3）获能   超数排卵

点评 本题考查了基因工程和胚胎工程的有关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，识记动物细胞培养的条件，掌握细胞核移植技术的过程，能结合所学的知识准确答题．