Question

8．下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．

请据图回答：
（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的脱氧核苷酸序列，再通过化学方法合成所需基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、模板（目的基因或A基因）、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
（3）基因工程的核心是基因表达载体的构建，为保证基因A的正常转录，图中C上基因A的两端应含有启动子、终止子．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子．
（5）基因A转录和表达产物的检测分别采用分子杂交、抗原抗体杂交技术．

Answer 1

分析 分析题图：图示是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图，其中A为目的基因，B为运载体（质粒），C为重组质粒，D为受体细胞．

解答 解：（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成双链DNA，从而获得所需目的基因；二是根据目标蛋白质的序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的序列，再通过化学方法合成所需目的基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、4种脱氧核苷酸、三磷酸腺苷和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成模板DNA．
（3）由A和载体B拼接形成C的过程通常称为基因表达载体的构建．基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等，为保证基因A的正常转录，图中C上基因A的两端应含有启动子和终止子．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子．
（5）要检测目的基因是否导入受体细胞采用DNA分子杂交技术，要检测目的基因是否表达，则采用抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）逆转录酶     氨基酸    脱氧核苷酸
（2）引物   模板（目的基因或A基因）
（3）基因表达载体     启动子、终止子（答不全不得分）
（4）使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子
（5）分子杂交     抗原抗体杂交

点评 本题结合制备“工程菌”的示意图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．