Question

（16分）斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。用个体M和N进行如下杂交实验。

（1）在上述转基因实验中，将G基因与质粒重组，需要的两类酶是____________和____________ 。将重组质粒用____________方法导入到斑马鱼受精卵中，整合到染色体上的G基因____________后，使胚胎发出绿色荧光。
（2）根据上述杂交实验推测：
①亲代M的基因型是（  ） （选填选项前的符号）。
a. DDgg                      b. Ddgg
②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括（ ） （选填选项前的符号）。
a. DDGG           b. DDGg            c. DdGG            d. DdGg
（3）杂交后，出现红·绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代（填“M”或“N”）的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中，同源染色体的_______发生了交换，导致染色体上的基因重组。

Answer 1

（1）限制性核酸内切酶 DNA连接酶显微注射法表达
（2）1 b  2 b d
（3）N 非姐妹染色单体

解析试题分析
（1）本题考查转基因内容，和遗传的基本规律，包括连锁互换。由题目可知，转基因的过程是用到同一种限制性核酸内切酶去切割目的基因和载体，再DNA连接酶，构建基因表达载体，将重组质粒用显微注射法导入动物细胞受精卵，整合后的G如果得到表达，胚胎会发出绿色荧光。
（2）杂交试验是应用孟德尔的遗传规律
十七号染色体上存在等位基因D,d
有纯合基因dd存在的时候，胚胎红色荧光，D-无红色荧光。
转基因G-表达绿色荧光和D在同一条染色体上连锁,没有绿色荧光的基因型是gg
亲代：      M                 N
胚胎无荧光     胚胎绿色荧光
D-gg        x   D-G-
↓
子代：绿色荧光 红色荧光  无荧光  红，绿荧光
D_G_        ddgg       D_gg     ddG_
根据基因分离和基因自由组合同时发生，不成对的基因具有互不干扰的特点
子代出现dd 推知亲本杂交方式是 Dd x Dd
子代出现gg 推知亲本杂交方式是gg x Gg
可知：亲代M的基因型是Ddgg      N的基因型是DdGg
子代只发出绿色荧光的胚胎基因型包括：DDGg， DdGg
（3）由于题目中交代D，G在基因分离时候会出现连锁现象，亲本N只能产生两种配子DG和dg，与M杂交时候是不会出现红绿荧光（ddG_）这样的表现型，若出现，则说明N产生了Dg的配子，这属于基因重组，发生在同源染色体非姐妹染色单体的交叉互换。
考点：本题考查基因工程的过程，孟德尔遗传基本规律中的分离，自由组合和连锁互换，掌握各知识点之间的内在联系。