Question

回答下列关于微生物的问题．
资料：
基本培养基：能满足某一菌种野生型菌株营养要求的最低成分的培养基．
补充培养基：营养缺陷型菌株必须在基本培养基中加入相应的一种或几种营养成分才能正常生长的培养基．
完全培养基：在基本培养基中加入一些富含氨基酸、维生素和碱基之类的天然物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基．
青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株．
营养缺陷型是一些营养物质（如氨基酸、维生素和碱基等）的合成能力上出现缺陷的菌株．某小组同学选用紫外线为诱变剂，诱发大肠杆菌（E．coli）突变，期望获得某种营养缺陷型菌株．用青霉素法淘汰野生型，并检出缺陷型．
（1）取一环E．coli置于5mL LB液体三角瓶中，37℃培养一段时间．LB培养液：酵母膏0.5g、蛋白胨1g、NaCl 0.5g、水100mL．LB是

 

培养基，如要配制成固体培养基则要添加

 

．
（2）取培养的菌液离心等处理，加入培养皿中加盖，置于15W紫外灯下30cm处照射1min，然后打开皿盖照射1-3min，置于37℃避光培养一段时间．此步骤的目的是

 

．
（3）取上述培养菌液离心等处理后于无氮培养基中37℃培养一段时间；加入含氮的基本培养基和青霉素，再37℃培养一段时间；从培养后的菌液中取0.1mL到含有基本培养基和完全培养基的两个培养皿中涂布，37℃培养．细菌先在无氮培养基中培养的目的是消耗体内的氮素，停止生长，避免

 

型被以后加入的青霉素杀死．这些步骤的目的是

 

．
（4）如果菌株在基本培养基和完全培养基中的菌落数大致相等，则说明

 

．对此，可能原因有

 

（写一点即可）．
（5）选择在完全培养基中生长的菌落分别点种在划线对应编号的基本培养基（A）和完全培养基（B）上培养．如图．点种的培养基的先后顺序是先基本后完全培养基．选在A上不生长在B上生长的菌落，在基本培养基上划线，培养．划线后可能细菌生长或者不生长，对结果进行分析：

 

．        
（6）对营养物质缺陷类型进行鉴定的过程，需要用到的培养基

 

（多选）．
A、基本培养基      B、完全培养基   C、补充培养基      D、选择培养基．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养

专题：

分析：大肠杆菌属于原核生物，细胞的拟核中只有裸露的DNA，用紫外线处理可以诱发大肠杆菌的基因突变．液体培养基与固体培养基的区别是培养基中有没有加入琼脂．青霉素可以破坏细菌细胞壁中的肽聚糖，可以淘汰的大肠杆菌的野生型菌株．

解答： 解：（1）由于LB培养液的配方中含有酵母膏和蛋白胨，富含氨基酸、维生素和碱基之类的天然物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基，所以是完全培养基．液体培养基与固体培养基的区别是培养基中有没有加入琼脂，如要配制成固体培养基则要添加2%琼脂．
（2）用紫外线处理可以诱发大肠杆菌的基因突变．
（3）细菌先在无氮培养基中培养的目的是消耗体内的氮素，停止生长，避免缺陷型被以后加入的青霉素杀死．是由题干中的操作是为了淘汰野生型菌株（浓缩缺陷型菌株）．
（4）根据题意分析可知，如果菌株在基本培养基和完全培养基中的菌落数不相等，且菌株在基本培养基少于完全培养基中的菌落数，说明获得缺陷型菌株．如果细菌的突变率低（或紫外线的剂量不够、紫外线照射时间不够），则菌株在基本培养基和完全培养基中的菌落数大致相等，则说明没有获得缺陷型菌株．
（5）根据题意可知，选在A上不生长在B上生长的菌落，在基本培养基上划线，培养．仍不生长的是缺陷型，生长的是野生型．
（6）根据题意，营养物质缺陷类型的菌株不能在基本培养基上生存，但可以在补充培养基上生存，所以进行鉴定时，需要用到基本培养基和补充培养基．
故选：AC．
故答案为：
（1）完全（或通用）  2%琼脂
（2）诱变
（3）缺陷    淘汰野生型菌株（浓缩缺陷型菌株）
（4）没有获得缺陷型菌株    细菌的突变率低/紫外线的剂量不够/紫外线照射时间不够
（5）仍不生长的是缺陷型，生长的是野生型
（6）A、C

点评：本题主要考查微生物的筛选与培养，影响强化学生对微生物的筛选过程和培养的相关知识的理解与运用，题目有一定的难度．