Question

12．如图是利用生物学技术制备单克隆抗体的两条途径模式简图．请据图回答相关问题．

（1）经过程①依据的原理是细胞膜的流动性、骨髓瘤细胞能无限增殖，B细胞能产生单一性抗体，通常用灭活的病毒诱导融合；过程②至少需要2次筛选才能得到X细胞．
（2）过程④所用的酶为逆转录酶．过程⑥常用Ca²⁺溶液处理大肠杆菌．
（3）结构甲为基因表达载体，结构甲组成的基本原件必须包括启动子、终止子、复制原点、标记基因及目的基因等．
（4）利用上述技术也可以生产干扰素（糖蛋白），但是用大肠杆菌只能生产无糖干扰素，原因是大肠杆菌是原核生物没有内质网和高尔基体．

Answer 1

分析 分析题图：细胞A表示效应B细胞，细胞Y表示杂交瘤细胞，结构甲表示基因表达载体，①过程表示动物细胞融合，②过程表示杂交瘤细胞的培养，③过程表示提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示导入受体细胞．

解答 解：（1）①表示效应B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的过程，其依据的原理是细胞膜的流动性，骨髓瘤细胞能无限增殖，B细胞能产生单一性抗体；诱导动物细胞融合通常用灭活的病毒；过程②至少需要2次筛选才能得到X细胞，第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选获得能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞．
（2）④为逆转录过程，需要逆转录酶的参与；将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca²⁺溶液处理大肠杆菌，使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）结构甲为基因表达载体，其基本原件包括启动子、终止子、复制原点、标记基因及目的基因等．
（4）利用上述技术也可以生产干扰素（糖蛋白），但是用大肠杆菌只能生产无糖干扰素，原因是大肠杆菌是原核生物没有内质网和高尔基体．
故答案为：
（1）细胞膜的流动性    骨髓瘤细胞能无限增殖，B细胞能产生单一性抗体     灭活的病毒      2
（2）逆转录酶      Ca²⁺溶液
（3）基因表达载体     标记基因     目的基因
（4）大肠杆菌是原核生物没有内质网和高尔基体

点评 本题考查单克隆抗体的制备、基因工程等相关知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等．动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础．单克隆抗体与常规的血清抗体相比．最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备．