题目内容

18．柴油是重要的燃料油之一，也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染．科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g，加入含100mL培养基M的锥形瓶中，在30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤连续培养5次，分离获得醋酸钙不动杆菌DB（一中柴油降解菌）．利用该菌，科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件，获得实验结果如图．请回答下列问题：

（1）为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以柴油为唯一碳源，还要考虑无机盐的种类和比例．
（2）在实验过程中，科研人员“30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或使柴油分解菌富集）．
（3）在分裂醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用平板划线法（填接种方法）在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行灼烧灭菌处理．培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的菌落进行重复培养，直到分离出单一菌株．
（4）据图分析，若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg．kg-1左右，并添加浓度为6mg．g-1的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果．

分析 分析柱形图：图1中，随着柴油添加量的增加，柴油的降解率呈先增加后下降的趋势，即在4000mg．kg-1左右柴油的降解率最高．
图2中，随着表面活性剂的浓度的上升，柴油的降解率呈不断增加的趋势，图中表面活性剂的浓度为6mg．g-1左右时降解率最高．

解答 解：（1）分析题意可知，醋酸钙不动杆菌DB是一种柴油降解菌，因此为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以柴油为唯一碳源，还要考虑无机盐的种类和比例．
（2）在实验过程中，科研人员“30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或使柴油分解菌富集）．
（3）在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用平板划线法或稀释涂布平板法在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行灼烧灭菌处理．培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的菌落进行重复培养，直到分离出单一菌株．
（4）根据柱形图结果可知，在柴油添加量为4000mg．kg-1左右柴油的降解率最高，表面活性剂的浓度为6mg．g-1时降解率最高，因此若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg．kg-1左右，并添加浓度为6mg．g-1的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果．
故答案为：
（1）柴油   种类 
（2）使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或使柴油分解菌富集）
（3）平板划线法    灼烧    菌落
（4）对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg．kg-1左右     6mg．g-1

点评 本题考查了微生物分离和纯化的有关知识，要求考生掌握选择培养基在分离微生物的实验过程中的运用，识记纯化微生物的接种方法，能够根据柱形图中的信息提出有效的降解柴油污染的措施．

练习册系列答案
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11．取经过编号的5支试管分别加入2mL0.5mol/L的过氧化氢溶液，进行如下实验．下列相关叙述正确的是（　　）
试管编号12345
加入物质适量唾液FeCl3溶液生土豆块熟土豆块生土豆块+稀盐酸
实验结果几乎无气泡少量气泡大量气泡几乎无气泡几乎无气泡
A．能说明酶具有高效性的是1组与3组的实验结果
B．3组与4组的对照能说明酶活性大小与温度的关系
C．1组与3组对照能说明不同酶催化的底物是不同的
D．1组与5组对照能说明酶在酸性条件下结构会改变
9．生物技术与社会现象、生产实际联系密切，请回答下列关于生物技术实践的问题．
（1）在果酒果醋的自然发酵过程中，酵母菌的来源是附着在果皮上的野生型酵母菌，发酵装置内加入果汁后要留出约$\frac{1}{3}$的空间，目的是有利于酵母菌有氧呼吸并进行快速繁殖；防止发酵过程中产生二氧化碳造成发酵液溢出．酒精发酵后转入醋酸发酵前，除改变温度外，还需调整的发酵条件是通入无菌空气．
（2）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种：

图一中的②、③过程需重复几次，目的是进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌．某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图二所示，推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
（3）制备固定化酵母细胞时要将干酵母活化，并将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中，以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的氯化钙溶液中，观察凝胶珠的形成．
（4）DNA粗提取与鉴定实验中，对最后得到絮状物进行鉴定时，先取两支试管，分别加入等量的2mol/L的NaCl溶液溶解絮状物，再向试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀，后续进一步的操作是将试管置于沸水中加入5分钟（等冷却后），比较两支试管中溶液的颜色．
6．下列有关人体细胞生命历程的叙述正确的是（　　）
A．细胞癌变过程中，多个基因发生突变，细胞膜上的糖蛋白减少
B．细胞生长过程中，体积增大，物质交换的效率却显著增强
C．细胞凋亡过程中，酶活性均下降，但有利于个体的生长发育
D．细胞分化后，核遗传物质保持不变，但全能性更强
13．强废弃鱼塘栽种芦苇、香蒲等湿地植物，将之改造成芦苇香蒲湿地，利用生物降解、吸收，可以有效解决生活污水和农业生产对水源造成的污染问题．下列有关芦苇香蒲湿地生态系统的叙述错误的是（　　）
A．芦苇香蒲同化的总能量是芦苇香蒲固定的太阳能和污水中的化学能
B．芦苇香蒲湿地不同地段物种组成上的差异是群落空间结构的体现
C．将废弃鱼塘改造为芦苇香蒲湿地的变化属于次生演替，体现了人类对群落演替的影响
D．芦苇香蒲湿地中生物种类多样，通过负反馈调节维持其结构和功能的相对稳定
3．油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆．B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在调控油菜的株高上有相同的效果，并且株高与B基因和G基因的数量呈正相关，科学家利用B基因培育转基因油菜．请回答问题：
（1）操作时，一般先将B基因转入农杆菌，常用质粒作为运载体，质粒是一种双链闭合环状的DNA分子．
（2）若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N（如图1所示）分别切割质粒和目的基因，得到的粘性末端在DNA连接酶的作用下相互连接，形成的碱基对序列是（依照图1的形式作答），连接后的序列不可以（“可以”或“不可以”）用M酶或N酶进行切割．
（3）在含有B基因的DNA片段上，限制酶M和N的切割位点如图2所示，Ⅱ所示空白部分为B基因位置．若采用直接从供体细胞中分离方法提取B基因，可选用酶N来切割． 
（4）若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜植株表现型为中杆．
（5）若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如图3所示）．

①与甲的株高相同的是乙和丁．四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3种表现型的是丙．
②另有一种转基因油菜的B基因插入位置与前四种不同，自交子代也有3种表现型，请在图4中的染色体上标出B基因的插入位置．
10．根据蛋白质合成示意图，以下说法正确的为（　　）
A．图中D为mRNA，C为tRNA
B．tRNA上与mRNA可以配对的三个碱基称为密码子
C．组成牛胰岛素的肽链共有51个氨基酸，作为合成肽链的模板信使RNA上至少有碱基153个
D．图中遗传信息的传递途径为DNA→RNA→蛋白质

【生物——选修模块1：生物技术实践】（15分）

（1）在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是 。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的 。

（2）在腐乳制作时，要加盐腌制，其目的是 。要制作出色香味俱全的腐乳，关键在于 的配制。

（3）在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中，需要氧气的是 。

（4）菊花组织培养所依据的原理是 ， 直接关系到实验的成败。配制MS固体培养基的母液时，无机物中的大量元素应浓缩 倍。配制好的培养基定容后要 ，分装后需进行 。
8．如图表示草原上某野兔种群数量的变化（K0表示野兔种群在无天敌进入时的环境容纳量），请分析回答相关问题．

（1）图中0→b时段内野兔的出生率大于（填“大于”“等于”或“小于”）死亡率，具体原因是种群数量较小，生存空间和食物相对宽裕，天敌数量较少等．
（2）某种天敌在图中标注的某个时间点迁入，一段时间后，野兔种群数量达到相对稳定状态，则该时间点最可能是C．在捕食压力下，野兔种群的环境容纳量降在K2-K3之间．
（3）用标志重捕法调查该草原上某区域的种群数量时，若部分标记个体迁出，则导致调查结果偏高（填“偏高”或“偏低”）；对捕获的野兔进行性别比例调查，发现其雌雄比例稍大于1，该比例有利（“有利”或“不利”）于种群增长．
（4）该草原随着环境的不断变化，此后可能慢慢长出小灌木丛，甚至有可能继续演替出森林，整个过程中属于次生演替，演替过程中不断出现新的优势种群，这主要体现了不同植被物种对阳光的竞争能力不同．

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