Question

2．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题．

（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术．
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了效应B细胞和记忆细胞 等细胞以及抗体物质，此过程属于特异性免疫中的体液免疫．
（3）细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径．辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径．
①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的氨基嘌呤成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体．（2分）
（4）此过程生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素（或HCG）特异性结合，从而诊断早孕．
（5）B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，常用的不同于植物细胞融合的手段是灭活的病毒，
在动物细胞原代培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．此时，瓶壁上形成的细胞层数是一层．而在体外培养杂交瘤细胞时，瓶壁上形成的细胞层数是多层．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点．
2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞．第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞．
3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点．②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”．
4、从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞．原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株．细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系．

解答 解：（1）制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯．要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术．
（2）如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，给小鼠注射的HCG相当于注射抗原，使小鼠产生分泌抗HCG抗体相应的效应B淋巴细胞．抗体是参与体液免疫的免疫活性物质．
（3）①氨基嘌呤可以阻断在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA．因此配制的HAT培养基中添加氨基嘌呤的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
（4）抗体与抗原发生特异性结合．人绒毛膜促性腺激素（或HCG）是抗原，可以与抗HCG单克隆抗体发生特异性结合．
（5）B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，采用的不同于植物细胞融合的手段是用灭活的病毒诱导细胞融合．细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖．由于接触抑制，动物细胞培养时，瓶壁上只能形成的单层细胞．而在体外培养杂交瘤细胞时，具有无限增值的特点，瓶壁上形成的细胞层数是多层．
故答案为：
（1）动物细胞培养　动物细胞融合　
（2）抗原　效应B细胞   记忆细胞   抗体　体液
（3）①氨基嘌呤　②能无限增殖并分泌特异性抗体
（4）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）
（5）灭活的病毒  相互接触  接触抑制  一层  多层

点评 本题考查了制备单克隆抗体的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力，难度适中．