Question

15．请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题：
（1）利用基因工程可以获得转基因羊．若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与羊乳腺分泌蛋白基因的启动子结合，使用该启动子的原因是让目的基因只能在羊乳腺细胞中表达．
（2）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中査询目的基因的核苷酸（或脱氧核苷酸）序列，以便合成引物．PCR过程第一轮循环的模板是目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）．
（3）目前常用的措施是将该基因表达载体导入羊的受精卵细胞，导入方法是显微注射法．
（4）体外受精时，需要对精子进行获能处理，卵母细胞需要培养至MII中期（减数第二次分裂中期）时期．

Answer 1

分析 1、基因工程操作的四个基本步骤是：获取目的基因，基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定．培育转基因动物时，一般用受精卵和胚胎干细胞作为受体细胞，因为这些细胞的全能性最大，易培养在一个新个体．当动物细胞作受体细胞时，一般采用显微注射法将目的基因导入．
2、精子与卵子受精时，精子要经过获能处理，卵子要发育到减数第二次分裂的中期才具备受精能力．

解答 解：（1）若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与羊乳腺分泌蛋白基因的启动子结合，启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA，从而让目的基因只能在羊乳腺细胞中表达．
（2）应用PCR扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物．PCR过程第一轮循环的模板是目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）．
（3）将目的基因导入动物细胞常采用的受体细胞是受精卵，方法是显微注射法．
（4）体外受精时对精子要进行获能的处理，卵母细胞也需要培养至减Ⅱ中期才具有受精能力．
故答案为：
（1）羊乳腺分泌蛋白      让目的基因只能在羊乳腺细胞中表达
（2）核苷酸（或脱氧核苷酸）     目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）
（3）受精卵       显微注射法
（4）获能       MII中期（减数第二次分裂中期）

点评 本题考查胚胎工程和基因工程的相关知识，难度不大，意在考查学生的识记和理解能力，解题的关键是掌握教材基础知识．