Question

12．利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA．下列错误的是（　　）

• A． 图乙中的Pl噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
• B． 构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和Pl噬菌体载体
• C． 构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和Pl噬菌体载体
• D． 用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和Pl噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA

Answer 1

分析 分析图解：图甲中可以看出，在目的基因上存在三种酶切位点，只有EcoR I具有两个切点，而BglⅡ和Sau3A I具有只有一个切点．图乙Pl噬菌体载体也具有这三种限制酶的切割位点．

解答 解：A、P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个SmaⅠ的切点，因此用EcoR I切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，A正确；
B、如果用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3A I切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；
C、由于Sau3A I的切割位点在EcoR I的左侧，因此用EcoR I和Sau3A I切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3A I切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，C正确；
D、从图甲看出，用EcoR I切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoR I切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误．
故选：D．

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握基因工程的原理、工具、操作步骤、应用等方面的知识，识记限制酶和DNA连接酶的生理作用，能够结合题干中图形进行准确分析．