题目内容
大肠杆菌常在生物技术上被制成“工程菌”．某小组的同学，利用实验室的大肠杆菌的品系及其他必要材料，对该品系大肠杆菌进行了培养、计数．请分析回答：
（1）微生物的培养基在制备时防止杂菌污染，常用的无菌技术包括 两个方法．
（2）在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，甲同学将平板倒置．他这样做的目的是 ．
（3）乙同学采用平板划线的方法接种，获得单菌落后继续筛选，在每次划线之前都要灼
烧接种环，他这样做的目的是 ．
（4）丙、丁2位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数．在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下2种统计结果：丙同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230；丁同学在该浓度下涂布了3个平板统计的菌落数分别为21、212、256，并且取平均值163作为统计结果；请评价这两位同学的实验结果的有效性．①丙同学 ，原因是 ．②丁同学 ，原因是 ．
（5）戊同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，但他无法断定该大肠杆菌的品系被污染了．他的理由是什么？ ．
（1）微生物的培养基在制备时防止杂菌污染，常用的无菌技术包括
（2）在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，甲同学将平板倒置．他这样做的目的是
（3）乙同学采用平板划线的方法接种，获得单菌落后继续筛选，在每次划线之前都要灼
烧接种环，他这样做的目的是
（4）丙、丁2位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数．在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下2种统计结果：丙同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230；丁同学在该浓度下涂布了3个平板统计的菌落数分别为21、212、256，并且取平均值163作为统计结果；请评价这两位同学的实验结果的有效性．①丙同学
（5）戊同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，但他无法断定该大肠杆菌的品系被污染了．他的理由是什么？
考点：微生物的分离和培养,测定某种微生物的数量
专题：
分析：1、实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长．
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素．配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌．
2．统计菌落数目的方法
（1）稀释涂布平板法（间接）
①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数．
（2）利用显微镜直接计数
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长．
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素．配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌．
2．统计菌落数目的方法
（1）稀释涂布平板法（间接）
①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数．
（2）利用显微镜直接计数
解答：
解：（1）常用的无菌技术包括消毒和灭菌两个方法．
（2）培养基倒置培养是为了防止水珠落入培养皿造成污染，可防止培养基表面的水分挥发，造成污染．
（3）在每次划线之前都要灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，以便从上次划线获取菌种．
（4）丙同学实验操作不合理，原因是只没有设置重复组，结果不具有说服力；丁同学也不合理，应选择30-300的菌落数进行计数，其中1个计数结果与另2个相差太远．
（5）在培养基上还有其他杂菌的菌落，由于杂菌可能来自培养基或来自培养过程，故无法断定该大肠杆菌的品系被污染了．
故答案为：
（1）消毒和灭菌
（2）皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，可防止培养基表面的水分挥发
（3）杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
（4）①不合理；没有设置重复组，结果不具有说服力 ②不合理； 1个计数结果与另2个相差太远（或在操作过程中可能出现错误，或只简单地计算了平均值）
（5）因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程
（2）培养基倒置培养是为了防止水珠落入培养皿造成污染，可防止培养基表面的水分挥发，造成污染．
（3）在每次划线之前都要灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，以便从上次划线获取菌种．
（4）丙同学实验操作不合理，原因是只没有设置重复组，结果不具有说服力；丁同学也不合理，应选择30-300的菌落数进行计数，其中1个计数结果与另2个相差太远．
（5）在培养基上还有其他杂菌的菌落，由于杂菌可能来自培养基或来自培养过程，故无法断定该大肠杆菌的品系被污染了．
故答案为：
（1）消毒和灭菌
（2）皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，可防止培养基表面的水分挥发
（3）杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
（4）①不合理；没有设置重复组，结果不具有说服力 ②不合理； 1个计数结果与另2个相差太远（或在操作过程中可能出现错误，或只简单地计算了平均值）
（5）因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程
点评：微生物的实验室分离是高考选修一内容的重点，考生应下功夫，重点掌握，特别是实验操作的细节，更是常考．
练习册系列答案
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小鼠是遗传学研究的常用实验材料，弯曲尾（B）对正常尾（b）显性．遗传学家针对小鼠的尾形进行了相应的遗传实验在光亮处用同一种培养液分别培养单细胞绿藻和酵母菌，其结果如图所示，原因是（ ）
| A、培养液中缺少无机盐 |
| B、培养液中缺少氧气 |
| C、培养液中缺少二氧化碳 |
| D、培养液中缺少有机物 |
下列可以作为自养微生物氮源的是（ ）
| A、N2、尿素 |
| B、牛肉膏、蛋白胨 |
| C、尿素、酵母粉 |
| D、铵盐、硝酸盐 |
下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（ ）
| A、CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化 |
| B、CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能 |
| C、糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解 |
| D、葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源 |
如何判断制作的培养基是否灭菌彻底（ ）
| A、看培养基是否透明 |
| B、有没有消灭细菌菌体 |
| C、未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后有无菌落生长 |
| D、消灭了微生物的芽孢、孢子 |
决定反射时间长短的主要因素是（ ）
| A、刺激强度的大小 |
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