题目内容

【题目】神经纤毛蛋白-1 (NRP-1) 是一种多功能糖蛋白,在多种肿瘤组织中呈高表达,可与血管内皮生长因子结合促进肿瘤血管的形成,使肿瘤体积增大。科研人员通过制备NRP-1单克隆抗体,开展对小鼠的乳腺癌肿块进行靶向治疗的研究。请分析回答:

(1)制备单克隆抗体涉及的动物细胞工程常用技术手段有_________________________(写出两项)。

(2)制备时,首先给小鼠注射___________________________,分离得到B细胞。将B细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后得到杂交瘤细胞,经系列处理选出______________________细胞注射到小鼠腹腔中,从腹水中提取到大量的NRP-1单克隆抗体。

(3)为了论证制取的单克隆抗体的治疗效果,研究者选择生长状况一致的小鼠,分别注射等量的乳腺癌细胞悬液,经饲养后,各小鼠均形成了体积基本相同的肿瘤。

①将上述小鼠随机分成实验组和对照组,实验组和对照组应分别注射____________,___________________,且每隔3天重复进行相同的注射操作,一段时间后测算发现,实验组小鼠的肿瘤体积都小于对照组,原因可能是_________________________发生特异性结合,阻断了___________________________的结合,从而抑制了肿瘤内血管生成,导致肿瘤体积减小。

②上述实验小鼠应选用没有___________________(器官)的动物模型鼠,由于这种鼠存在免疫缺陷,实验时可以避免小鼠的免疫系统对NRP-1单克隆抗体和乳腺癌肿块进行攻击,从而保证实验结果更可靠。

【答案】动物细胞培养、动物细胞融合 NRP-1(神经纤毛蛋白-1) 能产生NRP-1抗体的杂交瘤(既能产生NRP-1抗体又能无限增殖的) NRP-1单克隆抗体溶液 (等量的)生理盐水 NRP-1单克隆抗体与NRP-1 血管内皮生长因子与NRP-1 胸腺

【解析】

单克隆抗体制备过程如下:

(1)制备单克隆抗体,需要通过动物细胞融合技术获得杂交瘤细胞,然后通过动物细胞培养技术获得单克隆抗体。

(2)制备NRP-1单克隆抗体时,首先给小鼠注射神经纤毛蛋白-1,从小鼠脾脏分离得到B细胞,然后将B细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后得到杂交瘤细胞,经系列处理选出既能产生NRP-1抗体又能无限增殖的细胞注射到小鼠腹腔中,从腹水中提取到大量的NRP-1单克隆抗体。

(3)①验证制取NRP-1单克隆抗体的治疗效果,应进行是否注射NRP-1单克隆抗体的对照实验。实验组应注射一定生理盐水配制的NRP-1单克隆抗体溶液,对照组应分别注射等量的生理盐水。实验组小鼠的肿瘤体积都小于对照组,原因可能是NRP-1单克隆抗体与NRP-1发生特异性结合,阻断了血管内皮生长因子与NRP-1的结合,从而抑制了肿瘤内血管生成,导致肿瘤体积减小。

②上述实验小鼠应选用没有胸腺的动物模型鼠,由于这种鼠存在免疫缺陷,实验时可以避免小鼠的免疫系统对NRP-1单克隆抗体和乳腺癌肿块进行攻击,从而保证实验结果更可靠。

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【题目】自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞,国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、鬼、猪、恒河猴以及人类都分离获得了ES细胞。ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型,而且还可以作为一种载体,将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体,更重要的是,ES细胞将会给人类移植医学带来一场革命。如图为利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)进行疾病治疗的相关研究图解。请回答下列问题:

(1)致癌基因通过a、c、d等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为__________,使用PCR技术扩增致癌基因时,在PCR反应体系中需添加的物质除了缓冲液、致癌基因模板,四种脱氧核苷酸原料、ATP、过量的引物,还需要添加___________。若对一个含致癌基因的DNA扩增n代,则需消耗___________对引物。

(2)ES细胞除可取自囊胚的内细胞团外,还可取自___________,过程b需要在培养液中加入___________,可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,再进行细胞移植以治疗相应的疾病。但要治疗人类因胰岛素B受损,胰岛素素分泌不足引起的I型糖尿病,却不能通过移植该胰岛B细胞,理由是_____________________。

(3)b过程体现了ES细胞在功能上具有___________的特点。图中b、c和d都属于胚胎工程的技术手段,胚胎工程是指对动物的________________所进行的多种显微操作和处理技术。

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