题目内容

【题目】1981EvansKaufman首次成功分离小鼠ES细胞,国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、鬼、猪、恒河猴以及人类都分离获得了ES细胞。ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型,而且还可以作为一种载体,将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体,更重要的是,ES细胞将会给人类移植医学带来一场革命。如图为利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)进行疾病治疗的相关研究图解。请回答下列问题:

1)致癌基因通过acd等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为__________,使用PCR技术扩增致癌基因时,在PCR反应体系中需添加的物质除了缓冲液、致癌基因模板,四种脱氧核苷酸原料、ATP、过量的引物,还需要添加___________。若对一个含致癌基因的DNA扩增n代,则需消耗___________对引物。

2ES细胞除可取自囊胚的内细胞团外,还可取自___________,过程b需要在培养液中加入___________,可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,再进行细胞移植以治疗相应的疾病。但要治疗人类因胰岛素B受损,胰岛素素分泌不足引起的I型糖尿病,却不能通过移植该胰岛B细胞,理由是_____________________

3b过程体现了ES细胞在功能上具有___________的特点。图中bcd都属于胚胎工程的技术手段,胚胎工程是指对动物的________________所进行的多种显微操作和处理技术。

【答案】转化 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 2n1 桑椹胚和原始性腺 分化诱导因子 ES细胞来自于小鼠,(组织相容性抗原不同)存在免疫排斥反应 发育的全能性 早期胚胎或配子

【解析】

分析题图:a表示将致癌基因导入小鼠的胚胎干细胞,b表示胚胎干细胞分化形成各种细胞,c表示利用早期胚胎培养技术获得早期胚胎,d表示胚胎移植技术,最终获得转基因小鼠。

1)致癌基因通过acd等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为转化;PCR技术扩增致癌基因需要缓冲液、致癌基因模板,四种脱氧核苷酸原料、ATP、过量的引物和Taq酶;由于原DNA分子的两条脱氧核苷酸单链不需要引物,因此对一个含基因BDNA扩增n代,则共需消耗 2n-1对引物。

2ES细胞可取自囊胚的内细胞团或早期胚胎的原始性腺或桑椹胚中;过程b是对ES细胞进行培养和诱导分化,所以需要加入分化诱导因子,诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化;ES细胞来自于小鼠,如果移植至人体则可能导致免疫排斥反应。
(3)b过程体现了ES细胞在功能上具有发育成完整个体的潜能,即具有发育全能性的特点。图中b、c和d都属于胚胎工程的技术手段,胚胎工程是指对动物的早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。

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【题目】神经纤毛蛋白-1 (NRP-1) 是一种多功能糖蛋白,在多种肿瘤组织中呈高表达,可与血管内皮生长因子结合促进肿瘤血管的形成,使肿瘤体积增大。科研人员通过制备NRP-1单克隆抗体,开展对小鼠的乳腺癌肿块进行靶向治疗的研究。请分析回答:

1)制备单克隆抗体涉及的动物细胞工程常用技术手段有_________________________(写出两项)

2)制备时,首先给小鼠注射___________________________,分离得到B细胞。将B细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后得到杂交瘤细胞,经系列处理选出______________________细胞注射到小鼠腹腔中,从腹水中提取到大量的NRP-1单克隆抗体。

3)为了论证制取的单克隆抗体的治疗效果,研究者选择生长状况一致的小鼠,分别注射等量的乳腺癌细胞悬液,经饲养后,各小鼠均形成了体积基本相同的肿瘤。

①将上述小鼠随机分成实验组和对照组,实验组和对照组应分别注射_______________________________,且每隔3天重复进行相同的注射操作,一段时间后测算发现,实验组小鼠的肿瘤体积都小于对照组,原因可能是_________________________发生特异性结合,阻断了___________________________的结合,从而抑制了肿瘤内血管生成,导致肿瘤体积减小。

②上述实验小鼠应选用没有___________________(器官)的动物模型鼠,由于这种鼠存在免疫缺陷,实验时可以避免小鼠的免疫系统对NRP-1单克隆抗体和乳腺癌肿块进行攻击,从而保证实验结果更可靠。

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