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【题目】请回答下列关于食醋酿制的相关问题:

(1)食醋的天然发酵醋醅中存在多种醋杆菌,拟从中分离出高产酸醋杆菌。取10g醋醅样品加入装有90mL_______的锥形瓶中,混匀后用_______法接种于培养基(用溴甲酚紫做指示剂,根据有无变色圈判断是否产酸)上,适宜条件下培养48h,挑取________的菌落,纯化培养。

(2)醋醅中常混入一些麸皮、谷糠来增加疏松程度,其作用是_______。除醋杆菌外,醋醅中还有红曲霉菌等微生物,这些微生物赋予了食醋独特的风味。若要分离出其中的红曲霉菌,可用_______(A.LB培养基 B.MS培养基 C.土豆培养基 D.牛肉汤培养基)培养。红曲霉菌具有的酯化酶、糖化淀粉酶等,除能赋予食醋独特的风味,还能_______,以增加产量。

(3)使用果胶酶处理可使食醋澄清。为减少果胶酶的使用量,常用脱乙酰几丁质为载体、戊二醛为偶联剂固定果胶酶,这种固定化方法属于_______。为了解固定化果胶酶的特性,科研人员进行了相关实验得到如下结果。据图分析,固定化果胶酶的优点是_______。

【答案】无菌水 涂布分离 变色圈大 增加通气性,以利于醋酸发酵(为醋酸发酵提供所需的氧气条件) C 提高淀粉等原料的利用(提高淀粉分解转化成葡萄糖) 共价偶联法 对pH的稳定性增加(pH改变不易失活、适用的pH范围更广)

【解析】

1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:

当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。

2、固定化酶的方法包括:包埋法(将酶、细胞或原生质体包埋在各种多孔载体中,使其固定化的方法。)、交联法(选择适宜的载体,使之通过共价键或离子键与酶结合在一起的固定化方法。)、吸附法(利用各种吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面上而使酶固定的方法。)、交联法(用双功能试剂或多功能试剂进行酶分子之间的交联,使酶分子和双功能试剂或多功能试剂之间形成共价键)。

(1)分离出高产酸醋杆菌首先需要将样品加入装有90mL无菌水的锥形瓶中,起到稀释的目的,用涂布分离法接种,48h后,目的菌落有变色圈,变色圈的大小可以反映菌落产醋酸的能力,因此需要挑选变色圈大的菌落纯化培养;

(2)由于醋酸菌是好氧菌,醋醅通常加入麦麸以增加通气性,利于醋酸发酵。红曲霉菌为真核生物,可以利用淀粉,要分离出红曲霉菌,可用土豆培养基培养。红曲霉菌有淀粉酶,可以提高淀粉等原料的利用,增加产量;

(3)用偶联剂固定果胶酶属于共价偶联法。从pH对果胶酶的活性影响图示可看出,固定化后的果胶酶对低pH的耐受度更高,在较低pH下仍保持较高活性。

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