题目内容
血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和部分CO2的运输．请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题．
（1）血红蛋白的提取方法可以采用 法．将实验流程补充完整：B为 ．
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，洗涤干净的标志是 ．释放血红蛋白的过程中起作用的是 ．
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的 液的目的是准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致．
（4）a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是 ．
（1）血红蛋白的提取方法可以采用
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，洗涤干净的标志是
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的
（4）a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是
考点：蛋白质的提取和分离
专题：
分析：1、血红蛋白的提取和分离一般可分样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步．
2、凝胶色谱法（分配色谱法）原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢．
3、图中A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱．
2、凝胶色谱法（分配色谱法）原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢．
3、图中A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱．
解答：
解：（1）血红蛋白的提取的常用方法是凝胶色谱法．图中A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱．
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，当离心后的上清液中没有黄色，说明洗涤干净了．在释放血红蛋白的过程中需要加入蒸馏水和甲苯．
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的磷酸缓冲液可以模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致．
（4）相对分子质量大的物质，无法进入凝胶珠中的通道孔，只能留在凝胶珠之间的空隙中，图中a分子大，所以a先出来．
故答案为：
（1）凝胶色谱法 样品的加入和洗脱
（2）离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯
（3）磷酸缓冲
（4）a
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，当离心后的上清液中没有黄色，说明洗涤干净了．在释放血红蛋白的过程中需要加入蒸馏水和甲苯．
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的磷酸缓冲液可以模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致．
（4）相对分子质量大的物质，无法进入凝胶珠中的通道孔，只能留在凝胶珠之间的空隙中，图中a分子大，所以a先出来．
故答案为：
（1）凝胶色谱法 样品的加入和洗脱
（2）离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯
（3）磷酸缓冲
（4）a
点评：对血红蛋白的提取和分离的实验操作的理解和掌握是本题考查的重点．
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