题目内容
【题目】Bcl2基因是细胞凋亡抑制基因,可以利用PCR技术检测其转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。下图为克隆猪的培育及Bcl2基因转录水平检测流程,下列说法正确的是( )
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A.图中A细胞表示减数第二次分裂中期的卵母细胞核,B细胞表示去核体细胞
B.用物理或化学方法激活移植后的细胞,使其完成减数分裂过程
C.图中过程X表示逆转录,获得的cDNA可用于克隆猪基因组的测序
D.利用Bcl2cDNA/cDNA的比值可初步检测Bcl2基因的转录水平
【答案】D
【解析】
分析题图:图示表示克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程,图中涉及动物体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、胚胎移植及PCR技术,其中mRNA→cDNA的X过程为逆转录过程.
A、图中A细胞为处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞,B为提供细胞核的体细胞,A错误;
B、重组细胞发育成早期胚胎需要经过有丝分裂的过程,B错误;
C、mRNA→cDNA的过程表示逆转录过程,该过程获得的cDNA中没有启动子、内含子等,不能用于克隆猪基因组的测序,C错误;
D、在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平,D正确。
故选D。
【题目】有资料表明胃癌细胞中有胃泌素相关基因的表达,而且外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。某科研人员为验证外源性胃泌素的上述作用,以及进一步研究丙谷胺对其作用的影响,进行了以下实验研究。请完善实验思路,并根据实验结果进行分析。
(要求与说明:用细胞流式测定仪测定细胞周期分布;实验结果测定的具体操作不作要求;培养过程中培养液变化忽略不计;实验条件适宜)
(1)完善实验思路:
①将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养,每组若干,各组处理如下。
甲组:_______;
乙组:50μL丙谷胺溶液+50uL细胞培养液;
丙组:_______;
丁组:100L细胞培养液。
③将上述样品在适宜条件下进行培养。48h后取部分样品测定________,并记录。
④_______,并记录。
⑤对实验数据进行统计分析,结果如下。
表:胃泌素和丙谷胺对X型胃癌细胞增殖及细胞周期的影响
组别 | 72h,570nm | 48h,各时期细胞百分比(%) | ||
OD值 | G1 | S | G2+M | |
甲 | 0.767±0.025 | 55.60 | 25.20 | 19.20 |
乙 | 0.559±0.020 | 70.10 | 20.05 | 9.85 |
丙 | 0.585±0.022 | 68.60 | 21.10 | 10.30 |
丁 | 0.561±0.026 | 70.00 | 20.00 | 10.00 |
(注:OD值大小可体现细胞增殖情况;丁组细胞的细胞周期T=20h。)
(2)实验分析与讨论:
①用OD值作为检测细胞增殖指标的依据是_______。甲组与丁组数据比较,说明甲组的处理最可能是促进了S期细胞的________,从而促进肿瘤细胞增殖。乙、丁组数据几乎没有差异,但甲、丙组数据差异明显,可见丙谷胺具有________作用。
②据表中数据,在答题卷相应坐标系中画出丁组细胞中核DNA含量的周期性变化曲线,并将坐标系补充完整________________。