Question

Ⅰ．农作物秸秆在生产实践中具有多种用途．在特定微生物产生的纤维素酶的催化下，秸秆中的纤维素可被分解为葡萄糖，经发酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，减少了人类生活对石油资源的依赖．请分析回答：
（1）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用

 

或

 

法进行接种，所用培养基以纤维素为唯一碳源，目的是只允许能产生

 

的微生物生长，而其他微生物均不能生长．在培养基中加入适量的刚果红染料，若观察到

 

即可初步筛选到目的菌．
（2）某研究人员经上述培养获得了三种微生物（甲、乙、丙），现通过如下实验比较三种微生物所产生纤维素酶的活性大小．
①将甲、乙、丙三种微生物经离心等方法处理后，制成酶浓度相同的纤维素酶提取液，取等体积的三种提取液分别与等量的纤维素悬浮液混合，在相同且适宜的pH和温度条件下放置一段时间．
②利用

 

试剂检测产物中的葡萄糖，并通过比较颜色深浅程度判断酶活性的大小．
③实验结果如下：

	甲提取液	乙提取液	丙提取液
颜色深浅程度	+	+++	++

注：“+”越多，颜色越深
由表分析，三种微生物产生的纤维素酶活性不同，最可能的原因是

 

．其中产生酶活性最强的微生物是

 

．
Ⅱ．有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用，长期以来因其使用量大、范围广，造成了水体污染等诸多环境问题．
（1）为了筛选甲胺磷（分子式如图）的降解细菌，将农药厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在

 

固体培养基上进行培养，可以对降解菌进行定向的

 

．
（2）在分离得到的菌株A中检测到了ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，这种蛋白质是在细胞的

 

上合成的．若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，应测定单位时间内

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：（1）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落；刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物．当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈．这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．
（2）让土壤中的微生物将淀粉水解后，产物是麦芽糖、葡萄糖等还原糖，加入斐林试剂以后，还原糖在加热的条件下，能够将斐林试剂还原成砖红色，颜色越深说明生成的氧化亚铜越多，代表还原糖就越多．

解答： 解：Ⅰ（1）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法；刚果红可以和纤维结合形成红色复合物，纤维素分解菌将纤维素分解以后，红色复合物消失，会形成透明圈．
（2）②检测还原糖用的试剂是斐林试剂，颜色越深说明还原糖越多．
③三种微生物产生的纤维素酶活性不同，取决于蛋白质的不同，影响蛋白质结构不同的原因是氨基酸的排列顺序或蛋白质的空间结构不同．
Ⅱ（1）为了筛选甲胺磷的降解细菌，需在以甲胺磷为唯一碳源固体培养基上进行培养，这样可以对降解菌进行定向的选择． 
（2）蛋白质的合成场所是核糖体，要定量分析ophc2蛋白的催化能力，应测定单位时间内甲胺磷的降解量．
故答案为：Ⅰ（1）稀释涂布平板    平板划线   纤维素酶    菌落周围出现透明圈
（2）②斐林
③不同酶的氨基酸序列不同    乙
Ⅱ（1）以甲胺磷为唯一碳源    选择
（2）核糖体   甲胺磷的降解量

点评：纤维素被纤维素分解菌分解以后产生还原糖，还原糖的鉴定可以用斐林试剂去鉴定，选修知识点在高考的考纲中的要求是可以和必修知识点联系的，而还原糖的鉴定就属于必修知识点，在复习中要加强选修与必修的联系．