Question

7．回答以下关于菊花茎尖组织培养的有关问题：
（1）菊花茎尖组织培养的MS培养基的主要成分包括：大量元素与微量元素、植物激素和蔗糖等，此外还要适量加入琼脂形成固体培养基．当培养基中细胞分裂素/生长素的比值大于1（用大于、小于或等于作答）时有利于丛芽的形成．
（2）接种若干天后，发现外植体周围出现杂菌污染，培养基其它部位没有杂菌，最可能的原因是外植体消毒不彻底．
II．为了分离、纯化、鉴定上述（2）中的杂菌，某同学采用平板划线法进行，回条以下问题．
（3）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是调整pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染．
（4）在纯化过程中，在固体培养基上划线时，正确的操作是D（单选）．
A．划线时，接种环采用酒精消毒
B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
D．接种时应在酒精灯火焰附近进行．

Answer 1

分析 植物组织培养技术：
1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）．
2、原理：植物细胞的全能性．
3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）．
4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．

解答 解：（1）菊花茎尖组织培养的MS培养基的主要成分包括：大量元素与微量元素、植物激素和蔗糖等，此外还要适量加入琼脂形成固体培养基．当培养基中细胞分裂素/生长素的比值大于1时有利于丛芽的形成．
（2）接种若干天后，发现外植体周围出现杂菌污染，培养基其它部位没有杂菌，最可能的原因是外植体消毒不彻底．
（3）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是调整pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染．
（4）A．划线时，接种环采用酒精灯灼烧灭菌，A错误；
B．划线分离时，不能把接种环深入到培养基中进行接种，只能在培养基表面进行划线操作，B错误；
C、划线时要将最后一区的划线不能与第一区的划线相连，C错误；
D．接种时应在酒精灯火焰附近进行，D正确．
故选：D．
故答案为：
（1）大量元素与微量元素            琼脂          大于
（2）外植体消毒不彻底
（3）调整pH          高压蒸汽灭菌          防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染
（4）D

点评 本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，难度适中．