Question

16．回答有关微生物培养方面的问题：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
琼脂	15.0g
自来水	定容至1000 mL

（1）该培养基配方含有微生物所需要的4类营养物质．其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素．
（2）该培养基按物理性质划分是固体培养基；按培养基的作用划分是选择培养基，该培养基具有该作用的原因是∥、该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖．
（3）在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高．
（4）若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后指示剂变红色．
（5）某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒，开始时向消过毒的罐头瓶中加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是酵母菌能分解葡萄糖形成酒精（或酵母菌进行无氧呼吸产生酒精），添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供所需的各种营养物质（或碳源、氮源、水、无机盐和生长因子）．
（6）若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸？不能，原因是醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长、采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是灭菌．
（7）检验饮用水大肠杆菌的含量时通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为D．在下面所示的四种菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是：稀释涂布平板法．

用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？需要．为什么？因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）．

Answer 1

分析 本题是对用于微生物培养的培养基的配方及营养成分、选择培养基的选择作用、常用的接种方法、无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴定等相关知识的综合性考查，回忆微生物培养的培养基的配方和营养成分、选择培养基的选择作、常用的接种方法的具体操作和目的，无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴然后结合问题进行解答．

解答 解：（1）分析表格中培养基配方可知，该培养基中含有碳源、氮源、水、无机盐4类微生物生长所需要的营养物质．
（2）该培养基配方中含有琼脂，所以按按物理性质划分是固体培养基．由于该培养基中尿素作为唯一氮源，只有分解尿素的微生物才能生长繁殖，不能利用尿素的微生物因缺乏氮源而无法生长繁殖，所以按功能划分，该培养基又是选择培养基．
（3）由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解．
（4）若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．
（5）某同学尝试使用罐头瓶在常温（21±3℃）下制作果酒，开始时向消过毒的罐头瓶加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的目的是酵母菌无氧呼吸产生酒精，添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供所需要的各种营养物质．
（6）若葡萄汁中含有醋酸菌，由于在葡萄酒发酵旺盛时是无氧条件，而醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长，所以醋酸菌不能将酒精转变成醋酸．
（7）纯化大肠杆菌的方法有稀释涂布平板法和平板划线法．题干中所说的方法是稀释涂布平板法，如图中的CAB就是逐步稀释获得的，而培养皿D是通过平板划线法获得的．稀释涂布平板法接种统计样本菌落数时需要进行对照实验，原因是需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）．
故答案为：
（1）4  
（2）固体  选择    该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖
（3）在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高      
（4）酚红  红
（5）酵母菌能分解葡萄糖形成酒精（或酵母菌进行无氧呼吸产生酒精）　所需的各种营养物质（或碳源、氮源、水、无机盐和生长因子）
（6）不能  醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长      灭菌
（7）稀释涂布平板法  D  需要  因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）

点评 本题的知识点是培养基的营养成分，选择培养基的选择作用，检测分解尿素的菌的方法，果酒制作的原理，主要考查学生对基础知识的掌握和运用．