题目内容

【题目】营养缺陷型菌株就是在突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答问题：

（1）过程①的接种方法为____________。培养基灭菌常用的方法是____________。与基本培养基相比，待测培养皿中的特有的成分是________。釆用影印法培养的优点是__________________。

（2）为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：①用接种针挑取_____（选填“菌落 A”或“菌落 B”）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养 12 天后，离心，取沉淀物用________洗涤 3 次，并制成菌悬液。培养过程中振荡的目的是____________________。

②吸取 lmL 菌悬液加入无菌培养皿中，倾注 15mL 融化并冷却至 4550℃的基本培养基，待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域，标记为 A、B、C、D、E。

③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末（如表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。

组别

所含氨基酸

A

组氨酸

苏氨酸

谷氨酸

天冬氨酸

亮氨酸

B

精氨酸

苏氨酸

赖氨酸

甲硫氨酸

苯丙氨酸

C

酪氨酸

谷氨酸

赖氨酸

色氨酸

丙氨酸

D

甘氨酸

天冬氨酸

甲硫氨酸

色氨酸

丝氨酸

E

半胱氨酸

亮氨酸

苯丙氨酸

丙氨酸

丝氨酸

在上述鉴定实验中，发现在培养基 B、C 区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于___。

【答案】稀释涂布平板法 高压蒸汽灭菌法 氨基酸 同种菌株的接种位置相同 菌落 A 无菌水 提高溶解氧、同时使菌体分散和营养物质均匀分布，让菌体与营养物质充分接触 赖氨酸缺陷型

【解析】

分析题图，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。

（1）根据过程①培养的效果图可以判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。分析题图，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌。与基本培养基相比，待测培养皿中的特有的成分是氨基酸。釆用影印法培养的优点是同种菌株的接种位置相同。

（2）为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，①用接种针挑取菌落A接种并培养；离心后菌株存在于沉淀物中，为了防止杂菌污染，需取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。培养过程中振荡的目的是提高溶解氧、同时使菌体分散和营养物质均匀分布，让菌体与营养物质充分接触。

③表中信息显示：B、C区域含有、其它区域不含有的氨基酸是懒氨酸，而实验结果只有B、C区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属懒氨酸缺陷型。

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