题目内容
【题目】研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，主要负责调节细胞周期，表达异常会导致它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量存在。抗H蛋白单克降抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。回答下列问题：
（1）H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如上图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原），应构建________（填“胞外”“跨膜”或“胞内”）区基因，转入原核细胞表达并提纯。
（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，将融合细胞在特定的_______培养基中进行筛选，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长，这种杂种细胞的特点是_____________________________________________________。
（3）上述杂交瘤细胞还需进行_______培养和_________检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）治疗乳腺癌时，将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这种治疗方案的优点是________________________________________________________________。
（5）细胞融合技术还可用于生物育种，能突破_______________________________________________。
【答案】胞外 选择 既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体 克隆化 抗体 既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量，疗效高、毒副作用少 有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
【解析】
单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。
诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。
（1）由于抗体主要存在于细胞外液中，因此根据H蛋白的结构图可知，若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因，由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区。
（2）将融合细胞接种在选择培养基中，从中选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是：既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。
（3）为获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，并多次筛选。
（4）单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高，既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量，疗效高、毒副作用少。
（5）细胞融合技术可以将不同的物种的体细胞进行融合产生新的个体，所以突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
名校课堂系列答案
