Question

如图表示培育转荧光蛋白基因克隆猪的流程，请回答有关问题：

（1）过程①表示

 

，其中用到的工具酶有

 

和限制酶．
（2）过程②最常用的方法是

 

．
（3）该培育流程中涉及的细胞工程技术有

 

、

 

．
（4）若要同时获得多头转荧光蛋白基因克隆猪，可在

 

期进行胚胎分割然后移植，进行该过程时应注意将

 

均等分割．
（5）第一代转荧光蛋白基因克隆猪体细胞中只含一个荧光蛋白基因．理论上它们的后代中，能发出荧光的个体占总数的

 

．

Answer 1

考点：基因工程的应用,胚胎工程的概念及操作对象

专题：

分析：分析图解，可以看出该荧光克隆猪涉及了多项生物工程技术．首先导入目的基因的猪胎儿成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与去核卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成荧光克隆猪．该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术．

解答： 解：（1）过程①表示表示基因工程的核心内容：基因表达载体的构建．该过程中需要用限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（2）目的基因导入动物细胞的方法一般为显微注射法．
（3）上述过程中，导入目的基因的猪胎儿成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与去核卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成荧光克隆猪．其中涉及到的细胞水平现代生物技术主要有动物细胞培养、细胞核移植．
（4）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．如果对囊胚进行分割时，应对内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
（5）第一代转荧光蛋白基因克隆猪体细胞中只含一个荧光蛋白基因，可以把该猪看成是Aa杂合子，该杂合子自交时，AA+Aa基因型的个体占全部后代的3/4．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建   DNA连接酶
（2）显微注射法
（3）动物细胞培养  细胞核移植
（4）桑椹胚或囊胚    内细胞团
（5）3/4

点评：本题考查了生物工程中的相关技术，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；从题目所给的图形中获取有效信息的能力．