Question

【题目】自生固氮菌可不与其它植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。

请回答下列问题：

（1）在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________（填序号）

①酒精灯 ②接种环 ③高压蒸汽灭菌锅 ④棉塞

（2）要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于________培养基上进行筛选。

（3）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是_______________________。

（4）涂布培养四天后，可通过观察________的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。

（5）为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如下表：

	甲菌	乙菌	丙菌	丁菌
菌量（个/mL）	2.1×105	2.5×105	1.8×105	2.0×105
含氮量（K）	3.32	4.38	5.34	5.32

①培养过程中需不断振荡的目的是________________________。

②可以采用________方法对固氮菌进行计数，假设计数室长和宽均为1 mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10 mL培养液中有固氮菌的数量为________个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应________。

③由上述结果可知，________菌的固氮效率最高。

Answer 1

【答案】

（1）②

（2）缺氮

（3）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果

（4）菌落

（5）①让固氮菌与培养液充分接触 ②抽样检测 2.8×108 对培养液稀释后计数 ③丙

【解析】

（1）在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中不涉及到接种所以不需要接种环。

（2）本实验是要获得固氮菌，所以在培养基的成分中不需要添加氮源。

（3）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果。

（4）通过观察菌落的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。

（5）振荡培养具有使发酵液充分溶解氧和菌体充分与培养液接触的作用，充分利用培养液中的营养物质。可采用抽样检测的方法进行计数。计数室长和宽均为1 mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10 mL培养液中有固氮菌的数量为2.8×108个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应对培养液稀释后计数。

③由上述结果可知，丙菌的固氮效率最高。