Question

【题目】酵母菌是来源于自然界的菌种，它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种，是酿酒师们长期研究的课题。

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有 ____________________等。(要求回答4种营养物质)

（2）当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，此时酵母菌为 ________________呼吸．

（3）从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在 _____________并且 _______________条件下进行培养．

（4）葡萄酒制作是否成功，发酵后需用 ________来鉴定，在 _______条件下，该物质与酒精反应呈现 ___________色。

（5）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用 __________________培养基，常用的接种方法 ________和 _________．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为 ______个/mL．该统计结果 ____________（低于、高于）实际值。

Answer 1

【答案】碳源、无机盐、氮源和水 有氧呼吸 无光 无氧 重铬酸钾溶液 酸性 灰绿 选择培养基 平板划线法 稀释涂布平板法 1000 低于

【解析】

本题的知识点是培养基的营养成分、酵母菌的代谢类型、用选择培养基进行分离微生物、酒精的检测、常用的接种方法、估算样品中活菌数的方法，主要考查学生对相关知识的记忆与综合运用．

（1）一般情况下培养基的基本营养成分都有水、碳源、氮源、无机盐四种类型．

（2）酵母菌的呼吸方式有两种，有氧呼吸和无氧呼吸，有氧呼吸的产物是二氧化碳和水，无氧呼吸的产物是二氧化碳和酒精，当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，说明此时酵母菌进行有氧呼吸．

（3）酵母菌是异养兼性厌氧菌，醋酸菌是异养需氧菌，蓝藻是光能自养需氧微生物，要从中选出酵母菌最简单的培养方法是在无光和无氧的条件下培养．

（4）酒精在酸性条件下与重铬酸钾溶液反应呈现灰绿色，因此葡萄酒制作是否成功，发酵后需用重铬酸钾溶液进行检测．

（5）为筛选和纯化酵母菌，应该用选择培养基，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法；根据估算样品中活菌数公式可得；样品中微生物的数量=（200+180+220）÷3÷0.2=1000个/ml．由于当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落数，所以该统计结果往往低于实际值．