Question

【题目】[生物—选修3；现代生物科技专题]

转基因克隆猪已经在我国培育成功．研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养．通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆．接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪．请回答：

（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的 ，以防止培养过程的污染．此外，应定期更换 ，防止 对细胞自身造成危害。

（2）基因工程中常用的运载体有 ，在基因工程中需要用到的工具酶是 ，筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的标记基因，标记基因的作用是 。

（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集 ，并在体外培养成熟．然后将转基因纤维细胞注入到 中，再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。检测目的基因是否整合到纤维细胞DNA分子上可采用 。

（4）为了提高 ，可以对处于 阶段的胚胎进行均等分割．将重组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应，并能与之建立正常的 上的联系，因此，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。

（5）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡．这最主要体现了生态工程的 原理（只填一项）。

Answer 1

【答案】（1）抗生素 培养液 细胞代谢产物积累

（2）质粒、噬菌体和动植物病毒（2分） 限制酶和DNA连接酶（2分）

检测目的基因是否导入受体细胞

（3）卵母细胞 去核卵母细胞 DNA分子杂交技术

（4）重组胚胎的利用率 桑椹胚或囊胚 生理和组织 （5）物种多样性

【解析】（1）动物细胞培养加入抗生素能防止杂交污染；应定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害；

（2）基因工程常用载体有质粒、噬菌体和动植物病毒；工具酶有限制酶和DNA连接酶；标记基因的作用是检测目的基因是否导入受体细胞；

（3）动物细胞核移植的受体细胞一般为去核的减二中期的次级卵母细胞细胞；检测基因是否整合到受体细胞上的方法是DNA分子杂交技术；

（4）胚胎分割能提高胚胎的利用率；胚胎分割选用的培养应处于囊胚或桑椹胚阶段；子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应；并能与外来胚胎建立正常的生理组织联系；

（5）物种多样性能提高生态系统的稳定性；