6. 枯草杆菌产生的蛋白酶具有催化分解蛋白质的活性,但极易被氧化而失活。1985年，美国的埃斯特尔将枯草杆菌蛋白酶分子中的第222位氨基酸替换后，虽然水解活性有所高￥考^资@源*网下降，但抗氧化能力大大提高。用这种水解酶作为洗涤剂添加剂，可以有效去除血渍、奶渍高￥考^资@源*网等蛋白质污渍。请根据材料回答高￥考^资@源*网下列问题：

(1)改造枯草杆菌蛋白酶的生物技术是 　　　　　　 　　　　　 　　　　 　 _。

(2)改造后的枯草杆菌中的控制合成蛋白酶的基因与原基因对比，至少有　　　　　　　　　个碱基对发生了变化。

(3)利用生物技术改造蛋白质，提高了蛋白质的　　　　　　 　　　　　 _ 性，埃斯特尔所做的工作，是对已知蛋白质进行　　　　　　 　　　 　　　 　　　 _。

(4)定点诱变技术是蛋白质结构改造中的 　　　　　　 　　　　 　　　 _。

5. 某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答高￥考^资@源*网下列有关动物细胞培养的问题：

(1)将数量相高￥考^资@源*网等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。

(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是___________。细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是_____________。

(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。

(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_____________。

(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A．B两组，A组细胞培养液中加入___________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A．B两组收集高￥考^资@源*网等量细胞，通过分别检测X基因在A．B两组细胞中的________或_______合成水平的差异，确定Y的药效。

4..糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物(如猪、牛)中获得。自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产，其操作的基本过程如图所示。

(1)图中基因工程的基本过程可概括为“五步曲”　　　　　　 　　　　　 _，　　　　　　 　　　　　 _，_　 　　　　　 _，　　　　　　 　　　　　 _， 　　　　　　　　　　。

(2)图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作　　　　　　 　　　　　 _，从其分子结构可确定它是一种　　　　　　　　　　 。

(3)根据碱基互补配对的规律，在　　　　　 _酶的作用高￥考^资@源*网下，把图中甲与乙拼接起来(即重组)，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，则b段与c段分别是　　　 。

(4)细菌进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为　　　　　 。目的基因通过活动(即表达)后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素。这是因为基因具有控制　　　　　合成的功能，它的过程包括　　　　　　　　　　　　　　 　。

3.高￥考^资@源*网下图所示为细胞融合技术的某一过程：

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(1)从A、B细胞到C细胞的过程中，必须用 　　　　　　 　　　　　 _处理。

(2)若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了　　　　　　 　　　　　 _　 ，这种酶可能是 　　　　　　 　　　　　 _酶，由此生成的A和B细胞称为　　　　　　 　　　　　 _。

(3)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为 　　　　　　 　　　　　细胞，由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为　　　　　　 　　　　　 _过程。这种细胞既能无限繁殖，又能产生 　　　　　　 　　　　　 　 _ 。

(4)若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，请解释原因　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

2.单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb，镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生高￥考^资@源*网下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。高￥考^资@源*网下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。

(1)从图中可见，该基因突变是由于________引起的。巧合的是，这个位点的突变使得原来正常基因的限制酶切割位点丢失。正常基因该区域上有3个酶切点，突变基因上只有2个酶切点，经限制酶切割后，凝胶电泳分离酶片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱，正常基因显示________条，突变基因显示________条。

(2)DNA或RNA分子探针要用________高￥考^资@源*网等标记。利用核酸分子杂交原理，根据图中突变基因的核苷酸序列(---ACGTGTT---)，写出作为探针的核糖核苷酸序列　　　　　　 。

(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠有胎儿Ⅱ-1-Ⅱ－4中基因型BB个体是　　　　　　 ，Bb的个体是　　　　 ，bb的个体是　　　　　　 。

1.在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组导入Ti 质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。

(1)基因工程是指在体外通过人工　　 和“拼接”高￥考^资@源*网等方法，对生物的基因进行　　 和　 重新组合，然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类所需的基因产物的技术。该技术又称为　　　　　　　　　 　。

(2)科学家在进行上述基因操作时，要用同一种　　　　　 分别切割质粒和目的基因，质粒和目的基因的黏性末端就可通过　　　　　　　　　　 原则而黏合。

(3)将携带抗除草剂基因的重组T_i质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F₁代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的_______， 原因是 　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　 。

(4)种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是　　　　 。

40. 高￥考^资@源*网下列关于定点诱变技术的说法，正确的是　　 (　　 )

A．对任何蛋白质的改造都可以用定点诱变技术

对已知空间结构的蛋白质可以用定点诱变技术

C．定点诱变技术是蛋白质工程中必须用到的技术

D．采用定点诱变技术通常可以改变蛋白质中多种氨基酸

第Ⅱ卷

39. 通过细胞杂交，要获得一个杂种植株，需要哪些步骤　　　　 (　 )

A．分离原生质→诱导原生质融合→组织培养方法→得到杂种植株

分离原生质→原生质融合→杂种植株

C．获取细胞→原生质融合→组织培养→杂种植株

D．获得细胞→原生质直接融合→组织培养→杂种植株

38. 在现代生物工程技术中，高￥考^资@源*网下列研究方案可能 实现其目的是(　 )

37. 高￥考^资@源*网下列有关质粒的叙述，正确的是(　 )

A.质粒是细菌细胞中能自主复制的小型环状DNA分子

　质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制

C. 细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的

D. 质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器