Question

【题目】某个实验小组对微生物的培养和五种香辛料提取的精油（编号为A、B、C、D、E）的抑菌能力进行了研究。首先制备了直径相同的圆滤纸片若干，灭菌后分别放入各组精油中浸泡处理。然后取各种待测菌悬液0．15 mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布，制成含菌平板。再取浸泡过精油的滤纸片贴在含菌平板上，每个培养皿贴浸过同一种精油的滤纸3片，放培养箱中培养一定时间。测定抑菌圈直径，结果取三次重复实验的平均值，其数据如表所示（单位：mm）。请分析回答：

（1）从香辛料植物中提取精油的方法有：__________。

（2）在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止_________，不同微生物培养时pH的要求往往不同，培养大肠杆菌和白葡萄球菌时需将培养基pH调至___。

（3）实验使用涂布器接种，接种前涂布器的灭菌方法为_________，接种后将培养基放置在培养箱中_____（填“需要”或者“不需要”）振荡培养。

精油种类 抑菌圈直径（mm） 菌种	A	B	C	D	E
大肠杆菌	21．1	26．0	15．1	24．0	23．2
白葡萄球菌	14．7	22．0	19．1	12．0	29．1
黑曲霉	24．6	33．0	26．0	24．5	49．6
青霉	25．3	38．2	24．3	25．1	42．8

?

（4）培养一定的时间后，可根据不同微生物在固体培养基上形成的菌落的________（答出2项即可）等特征区分不同的微生物。

（5）根据实验结果，不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同，其中精油______对真菌的杀伤作用最强。该实验还缺少一组空白对照，请尝试补充：______________。

Answer 1

【答案】蒸馏、压榨和萃取??? 外来杂菌的入侵（杂菌污染）??? 中性或微碱性??? 沾取酒精，引燃??? 不需要??? 形状、大小、隆起程度、颜色??? E??? 增加一组未用精油浸泡的滤纸片进行实验???

【解析】

1、植物芳香油的提取方法：蒸馏法、萃取法和压榨法等。?
（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性。把含有芳香油的花、叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，这种提取方法叫蒸馏法。根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏。?
（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机溶剂中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油。?
（3）压榨法：在橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法。

2、在探究精油对微生物的抑菌能力时，实验用的培养基中需要加入琼脂，使液体培养基转化成固体培养基，方便测量抑菌圈直径。判断精油的抑菌能力大小的指标是抑菌圈直径大小，抑菌圈直径大则说明精油的杀伤作用大。

（1）从香辛料植物中提取精油的方法有蒸馏、压榨和萃取。

（2）在微生物培养过程中，防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键，不同微生物培养时pH的要求往往不同，培养大肠杆菌和白葡萄球菌时需将培养基pH调至中性或微碱性。
（3）涂布器的灭菌方法为将涂布器沾取酒精，在酒精灯的外焰引燃，待涂布器上的酒精燃烧完冷却后进行涂布操作，接种后将培养基放置在培养箱中，由于是固体培养基因此不需要振荡培养。
（4）菌落是鉴定不同微生物的主要特征，菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面，可根据不同微生物在固体培养基上形成的菌落的特征区分不同的微生物。
（5）根据实验结果，不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同。分析表中数据可知，精油E对黑曲霉和青霉形成的抑菌圈大于其它种类的精油，所以精油E对真菌的杀伤作用最强。该实验还缺少一组空白对照，由于该实验的目的是研究五种香辛料提取的精油的抑菌能力，空白对照补充如下：增加一组未用精油浸泡的滤纸片进行的实验，其它条件均相同。