题目内容

【题目】真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有。原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT—PCR技术(mRNA逆转录为 cDNA再进行PCR扩增），获得了牛基因G，导人到大肠杆菌中，成功表达出G蛋白。请回答下列问题：

（1）RT-PCR过程需要的酶有___________。进行PCR扩增的前提是_______，以便能够设计出需要的________种引物序列。

（2）在构建基因表达载体时，RT—PCR的产物和PBV载体都要经过BamH I和 EcoRI两种酶切后再连接，目的是_________(答出两点）。

（3）若要检测基因G是否翻译出蛋白G，可采用的检测方法是___________。有人从牛的基因组文库中获得了基因G，同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白G，其原因是________。

【答案】逆转录酶和Taq酶（热稳定DNA聚合酶） 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 2 防止目的基因（载体）自身连接，防止目的基因与运载体反向连接 抗原一抗体杂交 从基因组文库获取的G基因有内含子，在大肠杆菌中，其转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出蛋白G

【解析】

1、真核生物的基因编码区是不连续的，含有内含子和外显子，内含子和外显子都会转录产生相应的RNA，但内含子转录来的RNA被切除产生的RNA为mRNA，之后翻译产生相应的蛋白质。原核生物的基因编码区是连续的，不含有内含子和外显子，编码区直接转录产生相应的RNA，之后翻译产生相应的蛋白质。

2、基因工程的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

（1）根据题意可知，RTPCR技术是mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增的过程，其中逆转录过程需要逆转录酶的催化，而PCR技术需要Taq酶（热稳定的DNA聚合酶）的催化。进行PCR扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便能够设计出需要的2种引物序列。

（2）在构建基因表达载体时，与单一酶切相比，双酶切可以防止目的基因（载体）自身连接，也可以防止目的基因与运载体反向连接。

（3）若要检测基因G是否翻译出蛋白G，可采用抗原抗体杂交；有人从牛的基因组文库中获得了基因G，同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白G，是因为从基因组文库获取的G基因有内含子，在大肠杆菌中，其转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，因此无法表达出蛋白G。

练习册系列答案
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【题目】下列有机物的检测试验中，导致试验失败的操作是

①脂肪鉴定时，花生子叶染色后，没有用50%的酒精洗去浮色 ②蛋白质鉴定时，把双缩脲试剂A液、B液混合后再加入蛋白质样液中 ③还原糖检测时，用50—60℃水浴加热 ④淀粉检测时，直接把碘液加到淀粉样液中 ⑤检测还原糖选用西瓜作为试验材料

A.①②⑤

B.②④⑤

C.③④⑤

D.①②④

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A. 抗利尿激素分泌增加

B. 机体散热量等于产热量

C. 下丘脑感受到体温变化，通过神经-体液发送信息

D. 人体骨骼肌细胞中产热量最多的部位是细胞质基质

【题目】在探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的催化作用时，实验人员设置了如下方案，下列叙述正确的是

试管编号

①

②

③

④

⑤

⑥

2ml3%的淀粉溶液

+

+

+

-

-

-

2ml3%的蔗糖溶液

-

-

-

+

+

+

1ml2%的淀粉酶溶液

+

+

+

+

+

+

温度（℃）

40

60

80

40

60

80

802ml斐林试剂

+

+

+

+

+

+

砖红色颜色深浅

++

+++

+

-

-

-

注：“＋”表示有；“－”表示无；最后一行“＋”的多少表示颜色的深浅。

A.②④对照，可用来验证酶的专一性

B.由①②③对照可推测出淀粉酶的最适温度为60 ℃

C.本实验的变量有一个：实验的反应温度

D.本实验的实验原理之一是斐林试剂与还原糖反应产生砖红色沉淀

【题目】实验材料的选取对实验成功非常关键。研究人员用30％蔗糖溶液对洋葱鳞叶、紫鸭跖草叶片和紫色大蒜鳞叶等进行质壁分离实验，结果如下表。下列说法正确的是

比较项目

洋葱

紫鸭跖草

大蒜

观察部位

鳞叶外表皮

叶片外表皮

鳞叶

细胞颜色

紫色

紫色+绿色(有保卫细胞)

紫色

细胞大小

大

适中

适中

质壁分离程度

0.29

0.22

0.71

分离后原生质层形状

不规则

不规则

近圆形或椭圆形

A.该实验需要在高倍镜下观察质壁分离现象

B.细胞颜色不同是由于液泡中色素的差异所致

C.结果表明，紫色大蒜鳞叶是观察质壁分离的理想材料

D.若实验前分别用纤维素酶处理各组材料，不会影响实验结果

【题目】多酶片是一种复方制剂，它主要是由胰酶、胃蛋白酶复合而成的一种药物，其说明书的部分内容如下。

（性 状）本品为肠溶衣与糖衣的双层包衣片，内层为胰酶，外层为胃蛋白酶。

（适应症）用于消化不良、食欲缺乏。

（用法用量）口服。一次2-3片，一日3次

（注意事项）本品在酸性条件下易破坏，故服用时切勿嚼碎。

回答下列问题。

(1)酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，具有_______等特点。由于胰酶和胃蛋白酶_______________，故可以加工成多酶片保存，方便患者使用。服用多酶片时不能嚼碎的原因是____________。

(2)多酶片为肠溶衣与糖衣双层包被，外层包被应为________(选填“肠溶衣”或“糖衣”)。糖衣以糖浆为主要包衣材料，有一定的防潮、隔绝空气、掩盖药物不良气味等作用；肠溶衣为一层特殊包裹物质，能很好保护胰酶不会在胃部被破坏的原因是_________。

(3)请利用提供的材料用具，设计实验探究pH对胃蛋白酶活性的影响。

备选材料用具：蛋白块若干，胃蛋白酶溶液，蒸馏水，一系列pH梯度的溶液，试管若干，恒温水浴锅。时钟等。

实验步骤：

①取规格相同的5支洁净试管，分别编号l、2、3、4、5；

②___________________；

③将试管置于37℃的恒温水浴锅中保温5min；

④向5支试管中各加人等量且适量的蛋白块；

⑤_____________。

(4)为进一步确认上述实验中，蛋白块的消失是否是胃蛋白酶催化所致，请提出实验改进的思路_____________。

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（2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过_____________处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加_________。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将胚胎发育到_____期进行_____处理。

（3）若所得到的“蜘蛛羊”(已知表达载体已进入细胞)乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用_____技术来检测。

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